魁蚶(Scapharca broughtonii)俗称赤贝、大毛蛤、血贝，是一种大型冷水性蚶类，在我国主要分布在黄渤海地区，尤以黄海北部的魁蚶资源集中、品质极佳(刘世禄等，2005)。魁蚶肉味鲜美、营养丰富，经济价值很高，在国际市场特别在日本深受消费者欢迎(王如才等，2008)。但由于国内外市场对魁蚶的大量需求，人们对其捕捞力度过大，导致我国魁蚶资源量大幅减少、种质质量严重下降(吴彪等，2013)。20世纪80年代，我国开始了魁蚶生态习性、繁殖生物学、人工育苗、海上养成等方面的研究，并取得了人工繁育技术的突破(唐启升等，1994; 郭学武，1994; 王俊，1994)，但有关魁蚶种质资源方面的研究较少。目前，在我国的山东、河北、辽宁等海域，魁蚶笼养技术已获得初步成功(马述法等，1996; 王兴林，1997; 张丽敏等，2013)，且养殖面积逐年增加，对优良品种的需求不断增加，迫切需要进行魁蚶育种的研究。

杂交育种是动植物改良遗传性状、培育优良品种的重要手段之一，在水生生物的品种改良和生产中发挥了重大作用(范兆廷，2005; 吴仲庆，2000; 谭杰等，2015; 范超晶等; 2016)。目前，有关海洋贝类杂交的相关研究已有很多报道，如虾夷扇贝(Patinopecten yesoensis)(于涛，2011)¹⁾、栉孔扇贝(Chlamys farreri)(常亚青等，2002、2006; 刘小林等，2003a、刘小林等，2003b、2005)、海湾扇贝(Argopecten irradians irradians)(郑怀平等，2004)、长牡蛎(Crassostrea gigas)(孔令锋等，2013)、珠母贝(Pinctada martensii、Pinctada chemnitzi、Pinctada maxima)(姜卫国等，1983)、皱纹盘鲍(Haliotis disversicolor)和杂色鲍(Haliotis diversicolor)(张国范等，2002; 蔡明夷等，2007)等，表明多数贝类的杂交子一代在生长、存活及生产性能等方面优于其亲本的自繁群体，目前已有多个研究成果得到大规模的推广养殖，并且取得了良好的效果。中国魁蚶与韩国魁蚶在外部形态、生长速度及性状的相关性等方面存在差异，吴彪等(2010)对韩国统营和中国江苏的两 个魁蚶群体进行了形态性状对体重的影响等方面的研究，发现两群体魁蚶各形态性状对体重的影响效果明显不同。梁超等(2010、2011)对1个韩国魁蚶群体和3个中国魁蚶群体的遗传特性及形态差异进行了分析，发现韩国魁蚶与中国魁蚶遗传距离相对于国内群体之间的遗传距离要大，预测将这两个群体的魁蚶杂交可能会产生可供利用的杂种优势。

1) 于涛. 栉孔扇贝(♀)×虾夷扇贝(♂)杂种优势遗传机理的研究. 上海海洋大学硕士研究生学位论文, 2011

本研究选用魁蚶中国群体和韩国群体进行杂交，比较不同杂交组与对照组在幼虫期与稚贝期的生长、存活状况，探究杂交组是否存在杂种优势，进而为魁蚶的杂交育种的生产实践提供基础资料。

1 材料与方法 1.1 材料

魁蚶中国群体为山东省长岛县采集的野生群体，韩国群体为韩国仁川海区野生群体。为保证实验的真实性与可行性，实验与车间生产同步进行，采用大水体育苗，每个群体采集1000个野生个体作亲贝，实验在中国水产科学研究院长岛增殖实验站内进行。

1.2 实验设计

设立4个组合，分别为韩国群体♀×中国群体♂(KC)、韩国群体♀×韩国群体♂(KK)、中国群体♀×韩国群体♂(CK)、中国群体♀×中国群体♂(CC)。实验设2个重复。

1.3 室内育苗

选择自然海区3龄、壳长7 cm以上、体格健壮的魁蚶作为亲体促熟，2-3只/m³室内暂养。为保证两个地理群体亲本性腺发育的同步性，水温6℃以下时，同时入池升温促熟。正常换水、投饵和倒池，每天升温1℃，至21℃恒温待产。投喂小新月菱形藻(Nitzschia closterium f. minutissima)和三角褐指藻(Phaeodacty- lum tricornutum)，投喂量为2×10⁵-5×10⁵ cell/ml。自然排放精卵后进行人工授精，21℃下孵化。D型幼虫密度培养为10个/ml，每天换水2次，换水后投喂叉鞭金藻(Dicrateria sp.)，投饵量为2×10⁴-3×10⁴ cell/ml，每5 d倒池1次。壳长250-270 μm出现黑色眼点时，投放附着基。

1.4 稚贝中间培育

选择条件好的海区保苗，装苗袋为双层，内袋30目，外袋60目，规格为25 cm × 40 cm，每袋装2万粒左右，每20袋为单串附坠石，垂挂于海区的浮绠上，定期清理网带上淤泥及杂物。壳长达0.5 cm时，分入20目网袋中，每袋1000粒。稚贝规格达1 cm时完成海区中间培育。

1.5 性状分析、取样及测量

分析的性状包括受精率、孵化率、幼虫期壳长与存活率、稚贝与养成期的壳长和存活率。

受精率(%)= 出现第一极体的卵子/所有卵子×100

孵化率(%)= 孵化出的D形幼虫/受精卵×100

幼虫期存活率(%)= 测量日存活的幼虫/第1天的幼虫×100

变态率(%)= 变态前幼虫数/变态后幼虫数×100

稚贝期最终存活率(%)=第150天存活的稚贝数/挂入海区的稚贝总数×100

幼虫期，在第1、5、10、18、22、27、35天取样，每组每次取50个个体，用卢戈氏液杀死固定，在160×的显微镜下用目微尺测量壳长，并统计存活率。

稚贝和养成期，在第60、100、125、150天，各实验组取样50个，用游标卡尺(精度0.02 mm)测量壳长，并统计存活率。

1.6 数据分析

用Excel对各实验数据进行整理，采用SPSS 19.0统计分析软件进行单因素方差分析(One-way ANOVA)及Duncan’s多重比较，P＜0.05为差异显著，结果用平均值±标准差(Mean±SD)表示。

参照孔令锋等(2013)的计算方法，计算杂交子一代各性状的杂种优势率(H，Heterosis)，公式为：

$H\left( \% \right) = ({F_1} - P)/P \times 100$

式中，F₁为杂交子一代性状的平均值，P为两自交组性状的平均值。

2 结果 2.1 受精率、孵化率的比较

各实验组的受精率、孵化率如表 1所示。4个实验组的受精率范围为82.65%-92.17%，其中，KC组的受精率最低，为82.65%，KK组的受精率最高，为92.17%，方差分析显示，自交组和杂交组之间的受精率存在显著差异，自交组较高，杂交组较低。4个实验组的孵化率变化范围为89.44%-91.32%，其中，KC组的孵化率最高，为91.32%，CC组的孵化率最低，为89.44%，方差分析表明，杂交组和自交组之间的孵化率无显著差异。

2.2 幼虫期生长比较

幼虫期各实验组幼虫的壳长和存活率如表 2所示。幼虫期为从D形幼虫1 d起到投附着基，KC组和KK组的壳长始终大于CK组和CC组，即卵子来源于韩国群体的幼虫生长较快，但二者间差异不大。到35 d时，KK组的壳长最大，达到571.6 μm，CC组的壳长最低，为498.6 μm。4个实验组中，CC组的存活率最高，为29.54%，KK组的存活率最低，为27.52%，但4个组之间无显著差异。

幼虫阶段杂交组生长和存活的杂种优势率如表 3所示。同自交组相比，杂交组KC组在壳长方面具有明显的杂种优势，并且在幼虫生长阶段，杂交组KC壳长的杂种优势率随着生长有逐渐增加的趋势。CK组则无明显的杂种优势率，在存活率和生长方面，杂种优势不明显。

2.3 稚贝期生长比较

稚贝期各实验组稚贝的生长如表 4所示。自下海暂养到结束暂养，KC组和KK组的壳长始终大于CK组和CC组，即卵子来源于韩国群体的稚贝生长比较快，100 d时，各组间壳长差异不显著；125-150 d，KC组壳长显著大于其他3组；到150 d，KK组的壳长最大，达到1.7 cm，KC组的壳长次之，达到1.6 cm，CK组的壳长最低，为1.3 cm。4个实验组中，在保苗率(即稚贝期最终存活率)方面，CC组及CK组大于KC组，而KC组又大于KK组，即卵子来源于长岛群体的稚贝保苗率较高；CC组的保苗率最高，为57.76%，KK组的保苗率最低，为42.19%。

稚贝期杂交组的杂种优势率如表 5所示，稚贝期的杂种优势率与幼虫期类似，与自交组相比，杂交组KC在壳长方面具有明显的杂种优势，并且在幼虫生长阶段，杂交组KC的壳长杂种优势率随着生长有逐渐增加的趋势，而CK组则无明显的杂种优势率。

3 讨论

杂交是进行动植物种质改良的重要有效手段之一，主要是通过杂交使后代获得杂种优势。杂种优势是指杂种子一代在生长力、繁殖力、产量、品质等性状上优于双亲的一种复杂的生物学现象，且双亲的差异越大，往往杂种优势越强，反之，越弱(孔令锋等，2013)。本研究采用来自不同区域的中国与韩国两个魁蚶群体，韩国魁蚶与中国魁蚶不仅在外形上存在差异，比国内群体之间的遗传距离要大(梁超等，2010)，利用这两个群体进行杂交可能产生较大的杂种优势。吴彪等(2013)运用Hoechst 33258染色、荧光显微观察方法研究了中国群体魁蚶和韩国群体魁蚶杂交的受精过程及早期胚胎发育过程，结果发现，中国魁蚶精子能够进入韩国魁蚶卵子，可以顺利完成受精过程及早期胚胎发育，胚胎能够顺利发育至D形幼虫，证明了二者进行杂交的可行性。

本研究4个实验组的受精率和孵化率均在80%以上，表明魁蚶中国群体和韩国群体未形成生殖隔离，双亲异性配子之间的亲和力高。但自交组的受精率均在90%以上，而杂交组的受精率为83.56%和82.65%，自交组显著高于杂交组，表明二者的精卵表面存在一定的差别，在精卵识别方面有一定的阻隔或困难。

生长速度及存活率是判断贝类种质质量和养殖效果的重要标准之一。韩国魁蚶相对中国魁蚶有两个明显的特点：一是其贝壳较薄，出肉率更高；二是其贝肉更加细腻鲜美，且在生长速度上有一定的优势(王廷贵，2012)。中国魁蚶虽然壳厚，但存活率比韩国群体高。中国魁蚶和韩国魁蚶杂交，结果显示，卵子来源于韩国群体的后代，生长速度比较快，而KC组杂交后代在幼虫期及稚贝期生长均表现出明显的杂种优势，杂种优势率分别为16.00%和14.29%。在其他水产动物的杂交实验中，如长牡蛎不同地理群体杂交后代在生长性状表现出一定的杂种优势(孔令锋等，2013)；不同群体海湾扇贝(墨西哥海湾扇贝M和海湾扇贝C)进行杂交，结果发现杂交后代在生长速度上表现出明显的杂种优势(Zhang et al，2007)；海胆杂交组12月龄的平均体重也表现出明显的杂种优势(Rahman et al，2000)。KC组杂交后代的存活率在幼虫阶段没有明显的优势，在稚贝期表现出了明显的杂种优势，而CK组杂交后代在壳长和存活率上均没表现出杂种优势。杂交后代杂种优势的表现受环境和遗传因素的共同影响。在幼虫期，室内培育环境条件是可控的，水质、水温、饵料等因素维持在较适水平，水中敌害生物较少，因此，即使自身的遗传特性存在差异，也不会表现出明显的存活差异。相反，到了稚贝期，海上养殖的环境条件不可控，水质、水温、饵料、敌害等环境因素随着季节不断变化，使得环境条件对魁蚶存活的影响非常大，自身遗传特性表现出来，抗病、抗逆等存活性状好的个体或群体得以存活下来，表现出较高的存活率。

近交暴露了个体的一些隐性有害基因，同时也使群体对环境的敏感性增加，极易造成近交衰退(王好锋等，2014)，而杂种优势是一种对近交衰退的一种有效补偿(马大勇等，2005)。在我国已经通过杂交获得了许多杂交新品种，特别是鱼类远缘杂交，不仅在杂种优势方面，而且在三倍体、四倍体、雌核发育及雄核发育等方面也取得了显著成果(吴清江等，1999; 李炎璐等，2012)。杂交在育种中发挥了重要作用，可使品种基因得到有效充分的利用，充分发挥物种的潜力。

本研究通过对魁蚶群体杂交的受精情况和杂种优势分析，发现魁蚶韩国群体(♀)×中国群体(♂)的杂交子代在生长及存活方面具有明显的杂种优势。因此，这两个群体杂交可能是改良现有养殖群体的有效途径之一。本研究为优良魁蚶苗种的培育、杂交育种和选择育种提供了十分重要的基础资料和理论依据，也为魁蚶种质的改良和新品种培育奠定了重要基础。