渔业科学进展  2018, Vol. 39 Issue (4): 74-82  DOI: 10.19663/j.issn2095-9869.20170609001
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引用本文 

汪春玲, 梁萌青, 徐后国. 凡纳滨对虾亲虾繁殖期间适宜投喂频率的研究[J]. 渔业科学进展, 2018, 39(4): 74-82. DOI: 10.19663/j.issn2095-9869.20170609001.
WANG Chunling, LIANG Mengqing, XU Houguo. Optimum Feeding Frequency for Litopenaeus vannamei During the Breeding Period[J]. Progress in Fishery Sciences, 2018, 39(4): 74-82. DOI: 10.19663/j.issn2095-9869.20170609001.

基金项目

中国水产科学研究院基本科研业务费(2016HY-ZD0401)资助

作者简介

汪春玲, E-mail:917438579@qq.com

通讯作者

梁萌青, 研究员, E-mail:liangmq@ysfri.ac.cn

文章历史

收稿日期:2017-06-09
收修改稿日期:2017-07-17
凡纳滨对虾亲虾繁殖期间适宜投喂频率的研究
汪春玲1,3, 梁萌青2,3, 徐后国2,3     
1. 上海海洋大学水产与生命学院 上海 201306;
2. 青岛海洋科学与技术试点国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室 青岛 266071;
3. 中国水产科学研究院黄海水产研究所 青岛 266071
摘要:在饱食投喂条件下,选用鲜活饵料沙蚕(Nereis succinea)对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)亲虾进行营养强化培育60 d,通过比较不同的投喂频率2次/d(F2组)、3次/d(F3组)、4次/d(F4组)对亲虾摄食、生长、繁殖性能、虾体组成和肝胰腺的消化酶活力的影响,旨在探究亲虾繁殖期间营养强化的最适投喂频率。结果显示,随着投喂频率的增加,亲虾的日摄食量逐渐增大,F2组显著低于F4组(P < 0.05),但与F3组差异不显著(P>0.05);亲虾的增重率和体长增长率呈先升高后降低的趋势,但无显著性差异(P>0.05)。不同的投喂频率对各组亲虾的单次产卵量、相对产卵量、无节幼体Ⅰ期个体数、无节幼体孵化率、蚤状幼体Ⅰ期个体数、无节幼体变态率、性腺指数、初产时间和产卵间期均无显著影响(P>0.05)。亲虾全虾主要体组成分水分、粗蛋白、粗脂肪、灰分含量也不受投喂频率增加的影响(P>0.05);F2组的胰蛋白酶和脂肪酶活力显著低于F3、F4组(P < 0.05),而不同实验组的胃蛋白酶和淀粉酶活力无显著性差异(P>0.05)。结合本研究的结果和生产实际情况,建议在饱食投喂条件下,凡纳滨对虾亲虾繁殖期间营养强化的适宜投喂频率为2次/d。
关键词投喂频率    生长    繁殖性能    消化酶活力    凡纳滨对虾亲虾    
Optimum Feeding Frequency for Litopenaeus vannamei During the Breeding Period
WANG Chunling1,3, LIANG Mengqing2,3, XU Houguo2,3     
1. College of Fisheries and Life Science, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306;
2. Laboratory for Marine Fisheries Science and Food Production Processes, Pilot National Laboratory for Marine Science and Technology(Qingdao), Qingdao 266071;
3. Yellow Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Qingdao 266071
Corresponding author: LIANG Mengqing, E-mail:liangmq@ysfri.ac.cn
Fund: This work was supported by the Special Scientific Research Funds for Central Non-Profit Institutes, Chinese Academy of Fishery Sciences(2016HY-ZD0401)
Abstract: A study was conducted to investigate the effect of feeding frequency on growth, reproductive performance, body composition and digestive enzyme of broodstock Litopenaeus vannamei. Experimental broodstock were fed with Nereis succinea for 60 days. Before the start of the experiment, the unilateral eye socket of each broodstock was placed on the eye as an individual marker and the initial body length and weight of each female were determined. The average initial body weight was 41.78 g and the average initial body length was 15.80 cm. The broodstock were randomly divided into three round pools, each with 40 shrimps. Three groups of broodstock were fed to satiation in two times per day, three times per day and four times per day, which were represented by F2, F3 and F4 groups, respectively. Results showed that the feeding amount of broodstock increased gradually with the increase of feeding frequency, and the F2 group was significantly lower than that in group F4 (P < 0.05), but there was no significant difference between the F3 group and the F2 group (P>0.05). The weight gain and body length growth of broodstock increased first and then decreased with the increase of feeding frequency, but there was no significant differences among treatments (P>0.05). Reproductive performances of Litopenaeus vannameimei were not affected by different feeding frequency in current study (P>0.05). There were no significant differences in single fecundity, relative fecundity, the number of nauplius stageⅠ, hatching rate, the number of zoea stage metamorphosis rate (N1-Z1), gonadosomatic index(GSI), first spawning time and the spawning intervals (P>0.05). The body composition of Litopenaeus vannamei including moisure, crude protein, crude Lipid and ash were not affected by feeding frequency (P>0.05). The results showed that the activity of trypsin and lipase of hepatopancreas in the F2 group was significantly lower than that in the F3 and F4 groups (P < 0.05), but there was no significant differences among the activity of pepsin and amylase in different experimental groups (P>0.05). Based on the results of this experiment and the actual production conditions, the optimum feeding frequency of nutrient fortification in Litopenaeus vannamei broodstock is suggested to be 2 times per day.
Key words: Feeding frequency    Growth    Reproductive performance    Digestive enzyme activity    Broodstock Litopenaeus vannamei    

凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)具有生长快、抗应激能力强、肉味鲜美、易进行集约化养殖等优点, 是目前国际水产品市场和世界虾类养殖业者深受欢迎的品种。经过十几年的发展,凡纳滨对虾已经成为我国最主要的对虾养殖品种(叶乐等, 2005)。但是,制约对虾养殖产业持续稳定发展最大的难题是苗种生产(陈泳先, 2012)。

饲料营养和投饲策略是决定养殖企业生产效益的关键因素(纪文秀等, 2011)。确定适宜的饲料和投饲方法不仅有助于提高亲虾的摄食率、饲料利用率和苗种质量,还能避免饵料的浪费,从而减少对养殖环境的污染(Burford et al, 2001)。陈泳先(2012)研究表明,亲虾在性腺发育和繁殖过程中,需要消耗大量物质和能量,并需要合成、积累大量卵黄物质供胚胎发育。因此,提供合适的饵料才能保证亲虾正常繁殖的营养需求。目前,沙蚕(Nereis succinea)是亲虾繁殖培育过程中最为常用的生物饵料,日投喂量很大,一般为亲虾体重的20%~30%(张玉玲等, 2017)。在生产上一般投喂4次鲜活饵料,由于其投喂量大,不仅容易破坏水质、传染病原,而且增加了工人的工作量。因此,投喂频率成为关系到亲虾正常的生长繁育和苗种生产企业经济效益一项越来越重要的因素。如果投喂频率过低,可能就不能满足亲虾繁殖期间的营养需求,亲虾的性腺成熟和正常的繁殖活动将受到严重阻碍,从而造成幼体质量下降,最终使得苗种生产难以继续;投喂频率过高则往往导致饵料系数上升、养殖成本增加以及养殖环境的恶化(Gershanovich et al, 1992)。目前,国内外关于投喂频率已有不少报道,但主要集中在鱼、虾的生长阶段,如草鱼(Ctenopharyngodon idellus)、鲇鱼(Silurus meridionalis)、鲈鱼(Lateolabrax japonicus)、日本沼虾(Macrobrachium nipponense)、星斑川鲽(Platichthys stellatus)、鳡鱼(Elopichthys bambusa)等(潘庆等, 1998; 何丽君等, 2003; 楼宝等, 2007; 宋大烨等, 2009; 孙丽慧等, 2010; 孙存军, 2011)。然而,投喂频率对亲虾繁殖阶段的影响尚未见详细的报道。为此,本研究比较分析了不同投喂频率对凡纳滨对虾亲虾的摄食、生长、繁殖性能、体组成和消化酶活力的影响,为苗种生产确定亲虾最佳投喂频率提供理论依据和技术支撑。

1 材料与方法 1.1 实验亲虾

本研究于2016年6月5日~8月5日在河北黄骅市鑫海生物技术有限公司进行。实验选取420 d、大小均匀、体质健壮、卵巢未发育成熟的凡纳滨对虾亲虾。雌虾初始体重为(41.78±0.62) g,体长为(15.80± 0.34) cm。雌虾暂养7 d,待其摄食正常、活力恢复后进行实验分组。

1.2 实验方法 1.2.1 实验设计

实验开始前,对每尾亲虾的单侧眼柄套上眼标作为个体标记,并测定每尾雌虾的初始体长、体重。随机将亲虾分于3个养殖池内,每池40尾虾。实验设3种投喂频率进行人工投喂,即2、3、4次/d,分别以F2、F3和F4组表示。具体投喂频率及时间见表 1。实验饵料为沙蚕(投喂前用高锰酸钾浸泡3 min后,清水洗净沥干),采取饱食投喂,2 h后收集残饵并计算日摄食量。饲喂30 d后,测定未剪眼柄的亲虾的终末体长、体重。

表 1 投喂频率及投喂时间 Table 1 Feeding frequency and feeding time
1.2.2 养殖管理

养殖场利用海水循环系统进行水温控制和水体净化,控制养殖系统水温为(27±2)℃,盐度为30±2,pH为7.8~8.0,溶解氧≥5 mg/L,氨氮≤0.6 mg/L,亚硝酸盐≤0.1 mg/L,水深为35~40 cm, 室内自然光照周期12 h。养殖池为室内圆形水泥池(容水量为3 m3, 直径为2 m)。每天09:00换水1次,及时捞出残饵、粪便和蜕皮。

1.2.3 亲虾的促熟和交配管理

实验釆用生产上常用的镊烫法摘除雌虾的单侧眼柄进行促熟。除眼柄是刺激虾蟹类性腺成熟和排卵的常用方法,普遍认为这是去除眼柄中的性腺抑制激素(王晓伟等, 2013)。雌虾在摘除单侧眼柄后,继续投饵培育3~5 d,就会出现性腺发育成熟个体。之后每天上午换水时,检查雌虾池中是否有性腺发育成熟即将产卵的个体,然后将性腺变成橘红色的雌虾选入到同一个雄虾池中进行交配。交配池为圆形跑道池,面积为20 m3左右,水深为0.4~0.5 m。性腺发育良好的雄虾约有100尾,有活力,反应灵敏,精荚呈白色且饱满凸出。

1.2.4 幼体的孵化和培育

每天提前12 h准备200 L的产卵孵化桶,每桶加入100 L经消毒过滤没有余氯的新鲜海水,同时,加入6×10–6的EDTA-2Na络合水中的重金属离子,并保持24 h不间断地微充气。交配一般在15:00~23:00进行。交配后,及时将带有雄虾精荚的雌虾捞出,放在产卵孵化桶中,做好标记待其产卵。动作尽量轻捷,避免因雌虾弹跳而使精荚弹出。22:00左右,不管雌虾是否己经成功交配,均捞出放在产卵孵化桶中。亲虾产卵结束后,及时捞出并在2 h内完成计数。雌虾所产的卵继续留在孵化桶内,每隔1 h翻动1次,直至次日16:00孵化出无节幼体并计数。孵化桶内存活下来的无节幼体在次日18:00左右变态成为蚤状幼体后计数统计(陈泳先, 2012)。

1.3 繁殖性能指标的测定 1.3.1 卵和幼体的计数

计数前,用手轻轻搅动水体使卵子或幼体均匀地分散在水中。用100 ml的烧杯从桶内5个固定位点打取水样,5次计数的平均值乘以1000,将其作为亲虾单次的产卵量和相应幼体的产量。同时,记下雌虾的组别、编号、日期以便进行统计,并计算相对产卵量、孵化率和变态率。

1.3.2 性腺指数和产卵情况的计算

实验末期,适时地选取性腺成橘红色的、即将产卵的雌虾进行解剖,取性腺称重,计算性腺指数。根据记录的每天产卵孵化雌虾的编号、数目和日期,计算每个实验组的初产时间、产卵间期。

1.4 样品采集和分析方法

实验结束后,每组各随机取6尾亲虾,用于全虾主要营养成分分析;投喂2 h后,每个实验组取9尾亲虾,置于冰盘上,剥离出肝胰腺,保存于–20℃冰箱中,用于测定消化酶活性。

水分含量用(105±2)℃常温干燥法;粗灰分含量用马弗炉550℃高温灼烧法;粗脂肪含量用索氏抽提法测定(Foss Tecator, Hoganas, 瑞典);粗蛋白的含量用凯氏定氮仪测定(VELP, UDK142 automatic distillation unit, VELP, Usmate, MB, 意大利)。

亲虾肝胰腺的胰蛋白酶、胃蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶的活力均采用南京建成生物工程研究所的试剂盒测定,实验步骤按照说明书进行操作。胰蛋白酶活性采用紫外光分光光度计测定,而胃蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶的活力均用酶标仪测定。胰蛋白酶活性单位定义:在pH、37℃条件下,每毫克蛋白中含有的胰蛋白酶每分钟使吸光度变化,0.003即为1个酶活力单位。胃蛋白酶活性单位定义:每毫克组织蛋白质在37℃下每分钟分解蛋白质生成1 μg氨基酸为1个酶活性单位。淀粉酶(AMS)活力单位定义:每毫克蛋白在37℃与底物作用30 min,水解10 mg淀粉为1个淀粉酶活力单位。脂肪酶活性单位定义:在37℃条件下,每克组织蛋白在本反应体系中与底物反应1 min,每消耗1 μmol底物为1个酶活力单位。

1.5 实验数据的统计分析

有关指标计算公式如下:

$ 日摄食量\left({{\rm{Daily}}\;{\rm{feeding}}\;{\rm{amount, DFA, g}}} \right) = \left({投喂量 - 残饵量} \right)/亲虾个体数 \\ 增重率\left({{\rm{Weight}}\;{\rm{gain}}\;{{\rm{rate, LR, \% }}}} \right) = \left({终末体重 - 初始体重} \right)/初始体重 \\ 体长增长率\left({{\rm{Growth}}\;{\rm{length}}\;{{\rm{rate, GLR, \% }}}} \right) = \left({终末体长 - 初始体长} \right)/初始体长\\ 相对产卵量\left({{\rm{Relative}}\;{\rm{fecundity, 1}}{{\rm{0}}^3}/{\rm{g}}} \right) = 总产卵量/ 亲虾体重 $
$ 孵化率\left({{\rm{Hatching}}\;{\rm{rate, }}\;{\rm{\% }}} \right) = 各组无节幼体的计数平均数 \\ \times 100/各组同一亲虾个体产卵量的计数平均数\\ 无节幼体变态率\left({{\rm{Metamorphosis}}\;{\rm{rate}}\;{\rm{, \% }}} \right) = 各组蚤状幼体的计数平均数 \\ \times 100/各组相应的无节幼体的计数平均数 \\ 性腺指数\left({\rm{(Gonadosamic}}\;{\rm{index, }}\;{\rm{GSI, }}\;{\rm{\%)}} \right) = 性腺重×100/亲虾体重 \\ 初产时间\left({\rm{(First}}\;{\rm{spawning}}\;{\rm{time}}\;{\rm{, h)}} \right) = 亲虾初次产卵的时刻 – 亲虾摘除单侧眼柄的时刻 \\ 产卵间期\left({\rm{(Spawning}}\;{\rm{interval}}\;{\rm{, h)}} \right) = 各组中同一亲虾个体连续两次成熟产卵的时间差 \\ $

采用SPSS 17.0统计分析软件对所有数据进行单因素方差分析(One-way ANOVA)。当达到显著差异水平(P < 0.05),则进行Tukey多重比较。所有数据均表示为平均值±标准误(Mean ± SE)。

2 结果 2.1 不同的投喂频率对亲虾摄食和生长的影响

不同实验组亲虾的DFA、初始体重、终末体重、WGR、初始体长、终末体长和GLR见表 2。从表 2可以看出,F4组的DFA最高,之后依次是F3和F2组。方差分析表明,F2组的DFA显著低于F4组(P < 0.05),但与F3组差异不显著(P > 0.05);WGR最高的是F3组,达17.56%,F4组次之,F2组最低,分别为15.74%和15.17%。单因素方差分析表明,3组之间没有显著差异(P > 0.05);亲虾体长GLR与WGR有相似的变化趋势,3组之间也没有显著差异(P > 0.05)。

表 2 不同的投喂频率对凡纳滨对虾亲虾摄食和生长的影响 Table 2 Effects of different feeding frequencies on the ingestion and growth of broodstock L. vannamei
2.2 不同的投喂频率对亲虾繁殖性能的影响 2.2.1 单次产卵量、相对产卵量、无节幼体Ⅰ期个体数、孵化率

不同实验组亲虾的单次产卵量、相对产卵量、无节幼体Ⅰ期个体数和孵化率见表 3。从表 3可以看出,随着投喂频率的增加,亲虾的单次产卵量呈先上升后下降的趋势。其中,最高的是F3组,为13.04×104,F4组次之,F2组最低,但3组之间无显著差异(P > 0.05);相对产卵量逐渐增大,但各组之间无显著差异(P > 0.05);各组的无节幼体Ⅰ期个体数与产卵量呈现相似的变化趋势,3组之间也无显著差异(P > 0.05);同样,孵化率F3组最高,为74.81%,高于F4组的69.80%和F2组的69.50%,但3组之间无显著差异(P > 0.05)。

表 3 不同的投喂频率对凡纳滨对虾亲虾单次产卵量、相对产卵量、无节幼体Ⅰ期个体数和孵化率的影响 Table 3 Effects of different feeding frequencies on the single fecundity, the relative fecundity, the number of nauplius stageⅠ and hatching rate of broodstock L. vannamei
2.2.2 蚤状幼体Ⅰ期个体数和变态率

不同实验组亲虾的蚤状幼体Ⅰ期个体数和N1~Z1(无节幼体Ⅰ期到蚤状幼体Ⅰ期)的变态率见表 4。从表 4可以看出,蚤状幼体Ⅰ期个体数随着投喂频率的增加呈先增加后减小趋势,即F3组的蚤状幼体Ⅰ期个体数最高,为8.52×104,F4组次之,F2组最低,分别为7.85×104和6.65×104,但3组之间没有显著性差异(P > 0.05);N1~Z1的变态率最高的也是F3组,F2组次之,F4组最低,但3组之间没有显著性差异(P > 0.05)。

表 4 不同的投喂频率对凡纳滨对虾亲虾蚤状幼体Ⅰ期个体数和变态率的影响 Table 4 Effects of different feeding frequencies on the number of zoea stageⅠ and metamorphosis rate(N1~Z1)in broodstock L. vannamei
2.2.3 性腺指数、初产时间、产卵间期

不同实验组亲虾的性腺指数、初产时间和产卵间期见表 5。从表 5可以看出,各组亲虾的性腺指数随着投喂频率的增加而增大,F2、F3和F4组的性腺指数分别为6.31%、6.74%和7.44%,但3组之间无显著差异(P > 0.05);初产时间也随着投喂频率的增加而减少,即F4组的初产时间最短,为128.60 h,F3组次之,F2组最长,但3组之间没有显著差异(P > 0.05);产卵间期F3组的最短,为72.00 h,F4组次之,F2组最低,分别为80.00 h和88.00 h,但3组之间没有显著差异(P > 0.05)。

表 5 不同的投喂频率对凡纳滨对虾亲虾性腺指数、初产时间和产卵间期的影响 Table 5 Effects of different feeding frequencies on the GSI, first spawning time and spawning interval in broodstock L. vannamei
2.3 不同的投喂频率对凡纳滨对虾亲虾全虾体组成的影响

不同的投喂频率对亲虾全虾体组成的影响见表 6。从表 6可以看出,亲虾全虾水分含量F3组最高,F4组和F2组的水分含量非常接近,单因素方差分析表明,3组之间没有显著差异(P > 0.05);全虾粗蛋白含量与水分含量有相似的结果;粗脂肪含量也呈现相同的变化趋势,即3组之间无显著差异(P > 0.05);全虾灰分含量在3组之间也无显著差异(P > 0.05)。

表 6 不同的投喂频率对凡纳滨对虾亲虾体组成的影响 Table 6 Effects of feeding frequencies on the body composition of broodstock L. vannamei
2.4 不同的投喂频率对凡纳滨对虾亲虾消化酶活力的影响

不同的投喂频率对凡纳滨对虾亲虾肝胰腺消化酶活力的影响见表 7。从表 7可以看出,胰蛋白酶活力随着投喂频率的增加而增大,F2、F3和F4组的胰蛋白酶活力分别为543.32、958.27和983.46 U/mg·prot。单因素方差分析表明,F2组的胰蛋白酶活力与F3、F4组差异显著(P < 0.05),而F3和F4组之间无显著差异(P > 0.05);脂肪酶活力也呈现相似的变化趋势,F2组的19.94 U/g·prot显著低于F3组的25.53 U/g·prot和F4组的26.54 U/g·prot(P < 0.05),但F3和F4组之间无显著差异(P > 0.05);不同实验组的胃蛋白酶活力随着投喂频率的增加呈增长趋势,但各组之间无显著性差异(P > 0.05);淀粉酶活力随着投喂频率的增加呈先增大后减少的趋势,但各组之间无显著差异(P > 0.05)。

表 7 不同的投喂频率对凡纳滨对虾亲虾肝胰腺消化酶活力的影响 Table 7 Effects of feeding frequencies on the digestive enzyme activities in hepatopancreas of broodstock L. vannamei
3 讨论 3.1 不同投喂频率对亲虾摄食和生长的影响

亲虾繁殖前需要积累大量营养物质以满足亲虾性腺发育、繁殖、产卵以及幼体正常发育和变态的需要(刘立鹤, 2005)。在苗种生产中,一般会在亲虾剪眼柄前进行营养强化培育,用以保证亲虾正常的繁殖活动。经过营养强化培育的亲虾,由于机体的摄食、消化吸收等机能得到强化,体内的营养物质得到了较充分的积累,因此,体长或体重会有所增加(陈永先, 2012)。营养强化期间,投喂方法一般分为2种,一种是固定日投饲率法,另一种是饱食投喂法。当采用固定日投饲率法时,适当地增加投饲频率可以促进鱼体的生长,澳大利亚金赤鲷(Pagrus auratus)稚鱼和尖吻鲈(Lates calcarifer)稚鱼的WGR随着投喂频率的增加而不断增加(Tucker et al, 2006; Biswas et al, 2010);但是,在日投喂量不能满足鱼类生长的营养和能量需求时,投饲频率的增加反而会抑制生长。这是由于养殖动物的摄食活动会消耗能量,过高的投喂频率会消耗更多的能量,从而降低生长速度(王华, 2009)。当采用饱食投喂时,适当地增加投喂频率能够显著影响水产动物的生长。军曹鱼(Raehycentron canadum)和鲤鱼(Cyprinus carpio)的研究表明,增加投喂频率显著提高了饲料效率,从而促进鱼体的生长;在南方鲇(Silurus meridionalis)、刺参(Apostichopus japonicus)、杂交太阳鱼(Lepomis gibbosus)和北极红点鲑(Salvelinus alpinus)的研究表明,增加投喂频率显著提高鱼的摄食率(何利军等, 2013; 王艺超等, 2016; 刘康等, 2010; Omar et al, 1987; 何利君等, 2003; Wang et al, 1998; Jobling, 1983)。

本研究采用饱食投喂法,在亲虾繁殖前30 d的营养强化培育中,随着投喂频率的增加,亲虾的DFA逐渐增大,其中,F2与F3组差异不显著,但显著低于F4组。而亲虾的生长呈先上升后下降的趋势,但各实验组之间无显著性差异。冒树泉等(2014)研究表明,在饱食投喂条件下,许氏平鲉(Sebastes schlegelii)幼鱼获得的高生长速度是以较高的摄食量与较低的饲料转化率得来的。本研究不同处理组的WGR并没有因为摄食量的逐渐增加而呈显著上升的趋势,这说明2次/d的摄食量已经满足了亲虾的生长需求,而且,投饲频率过高反而使得亲虾忙于摄食和消化,这样会使得其体内的能量消耗过快, 生长速度就会降低。

3.2 不同投喂频率对亲虾繁殖性能的影响

亲虾的繁殖性能与繁殖期间亲虾体内营养积累以及持续供给的饲料有很大关系(刘立鹤, 2005)。当食物的数量和质量不能很好地满足亲虾性腺发育时,会极大地影响亲虾的产卵量、胚胎发育和幼体的成活率。目前,鲜活或冰冻的天然饵料[沙蚕、鱿鱼(Todarodes pacificus)、牡蛎(Ostrea gigas)、双壳贝类等]一直是亲虾的首选饵料,其中,沙蚕是最常用的(Lytle et al, 1990; Wouters et al, 1999)。纪丽丽等(2008)分析沙蚕的营养成分表明,其蛋白质含量极高,达到58.65%;体内不饱和脂肪酸质量分数高达62.21%,且EPA和ARA质量分数也较高。这不仅为凡纳滨对虾的生长繁殖提供丰富的营养物质,而且提高了对虾的免疫力和存活率。同时,特殊的呈味氨基酸(天冬氨酸Asp、精氨酸Arg、谷氨酸Glu、甘氨酸Gly和丙氨酸Ala)促进了亲虾的摄食。李爱杰等(1999)研究表明,人工饲养亲虾时,饲料充足则性腺发育较快,不足则发育慢,甚至可能导致发育不良。本研究选用沙蚕为投喂饵料,亲虾的单次产卵量、相对产卵量、无节幼体Ⅰ期个体数、无节幼体孵化率、蚤状幼体Ⅰ期个体数、无节幼体变态率、性腺指数、初产时间和产卵间期在各组之间均无显著差异,这可能是由于研究周期内不论是投喂2次/d,还是投喂3次/d及4次/d,在一定程度上满足了亲虾繁殖的营养需求。其中,2次/d的投喂频率不仅减少了养殖人员的劳动量,降低了养殖成本,而且对亲虾的繁殖性能并没有显著影响。

3.3 不同投喂频率对亲虾体组成的影响

本研究结果显示,不同投喂频率对亲虾体组成无显著性影响,表明2、3、4次/d的投喂量适合亲虾的生长,提高投喂频率并不改变虾体的主要营养组成。这与周歧存等(2003)对南美白对虾幼虾的研究结果和宋大烨等(2009)对日本沼虾研究结果一致。投喂频率对鱼类体组成的影响在国内外已有较多研究。杜海明(2007)研究发现,投喂频率显著影响鳡鱼幼鱼的体组成,其蛋白质含量随投喂频率的增加呈先升高后下降的趋势,脂肪含量则逐渐上升,而水分和灰分含量逐渐下降。骆季安等(2007)研究发现,日本黄姑鱼(Nibea japonica)的水分含量随饲喂频率的增高而降低,蛋白质含量随饲喂频率的增加呈先显著增高后下降的趋势,而脂肪含量显著升高。孙晓峰等(2011)对吉富罗非鱼幼鱼(Oreochromis niloticus)研究发现,随着投喂频率升高,脂肪和蛋白质含量逐步升高,鱼体水分含量逐渐降低。Baloi等(2016)研究表明,投喂频率显著影响巴西沙丁鱼(Sardinella brasiliensis)脂肪含量,而蛋白和灰分含量无显著差异。Yu等(2013)对胭脂鱼(Myxocyprinus asiaticus)研究表明,随着投喂频率的增加,粗脂肪含量显著增加,而必需氨基酸含量无显著差异。Wu等(2015)研究表明,随着投喂频率的增加,金鲳鱼(Trachinotus ovatus)的粗脂肪含量显著增加,而水分和灰分含量下降。可见,不同的投喂频率对鱼类的营养组成影响较大,对虾的体组成没有显著影响。这可能由于当沙蚕投饲量较适合亲虾生长时,即使提高投喂频率, 也不会改变虾体的主要营养组成。

3.4 不同投喂频率对亲虾肝胰腺消化酶的影响

本研究表明,不同的投喂频率对凡纳滨对虾亲虾肝胰腺的胃蛋白酶和淀粉酶活力无显著影响,而3、4次/d的胰蛋白酶、脂肪酶活力显著高于2次/d。这与在俄罗斯鲟幼鱼(Acipenser gueldenstaedtii)、条斑星鲽(Verasper moseri)、凡纳滨对虾幼虾阶段上的研究结果相一致,这可能因为投喂频率较高组通过减少单次摄食量达到一定的限食作用,而亲虾在限食条件下食欲会增加,从而提高了消化酶活力(崔超等, 2014; Amiya et al, 2012; 陈文霞等, 2013)。而强俊等(2009)等对奥尼罗非鱼仔稚鱼(Oreochromis niloticus×O.aureus)的研究发现,胃蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶活力随投喂频率的升高而显著下降,胰蛋白酶活力无显著差异,许氏平鲉幼鱼(Sebastes schlegeli)研究表明,1次/d组的胃蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性显著高于2、3、4次/d的实验组(冒树泉等,2014)。王武等(2007)研究发现,瓦氏黄颡鱼(Pelteobagrus vachelli)投喂频率较高组虽然日摄食率高,但每次摄食率明显低于投喂频率较低组,因此,其胃和肠蛋白酶活力均较低。不同的投喂频率对消化酶活力的影响还有待进一步的研究。

4 结论

综上所述,2、3、4次/d这3个投喂频率对亲虾的生长、繁殖性能和体组成无显著影响;F2组的摄食量显著低于F4组,但与F3组差异不显著。2次/d的实验组的胰蛋白酶和脂肪酶活力显著低于3、4次/d的实验组,而不同实验组的胃蛋白酶和淀粉酶活力无显著差异。建议在饱食投喂条件下,凡纳滨对虾亲虾繁殖期间营养强化的适宜投喂频率为2次/d。

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