盘属(Discogobio)鱼类属于小型底栖鲤科(Cyprinidae)鱼类，对流水环境有特殊适应性，主要栖息于江河上游干支流及其溪流，营底栖生活(褚新洛等, 1993; 周伟等, 2011)。因长期适应急流生活环境，其口唇及其相关结构发生相应的变化，下唇逐渐向后伸展，颏部隆起特化为具有马蹄形褶皱的口吸盘结构(郑兰平, 2007)，该结构在同为野鲮亚科(Labeoninae)的部分其他属级单元中同样存在，如墨头鱼属(Garra)、盘口鲮属(Discocheilus)和盆唇鱼属(Placocheilus)等(张鹗, 1998; 乐佩琦, 2000)，但发达程度不同、形状大小不一。因此，多样化的口唇结构不仅是鉴别盘属鱼类的一个重要特征，也是盘属鱼类与其他属级单元分类和系统发育分析的主要依据。目前，关于盘属乃至整个野鲮亚科鱼类的研究较少(耿相昌, 2010; 张惠芬等, 2010; 杨琴等, 2011; 蒲德成等, 2015; Xue et al, 2016; 赵健蓉等, 2017a、b; 蔡瑞钰等, 2018a、b)，口吸盘的研究尤甚，仅见周伟等(1993a、b)对云南盘等几种盘鱼类进行过相关研究。研究表明，口吸盘是抵御流水冲击的吸附器官和运动辅助器官，并兼具辅助摄食的功能。但由于该研究局限于野外收集到的标本，无法全面了解口吸盘发育特点以及相对应的适应性功能。因此，有必要对此构造开展更深入的研究。本研究以刚出膜的云南盘(Discogobio yunnanensis)仔鱼为实验材料，观察口吸盘从无到有、从简单到完善的过程，以期探讨云南盘口吸盘结构与功能间的联系。由于盘的吻皮、吻须、口角须等在一定程度上参与吸附和运动过程，因此，本研究中的口吸盘含义稍广，不仅指口部后方的盘状结构，还包括吻皮、吻须和口角须。

实验仔鱼为实验室2016年6月人工繁殖所得。实验期间，仔鱼饲养于循环水族箱(0.45 m×0.20 m× 0.35 m，长×宽×高)中，水深为0.3 m。实验用水充分曝气，溶解氧(DO) > 7 mg/L，水温为(20.0±0.5)℃，pH为7.6±0.5，光暗周期为14 L : 10 D。仔鱼开口饵料为丰年虫(Artemia salina)无节幼体，后期根据鱼体口裂大小逐渐使用微颗粒饲料代替，每天2次饱食投喂，投喂30 min后，吸去粪便和残饵并换水1/3。

从仔鱼出膜开始，定期观察并记录云南盘口吸盘发育情况，直至口吸盘结构基本与成鱼相似。具体操作如下：根据云南盘口吸盘发育状况，在口吸盘具有代表性的各发育节点随机选取10尾鱼，使用间氨基苯甲酸乙酯甲磺酸盐MS-222(25 mg/L)麻醉，为保证成像效果，在Bouin氏液中染色60 s后拍照。当鱼体较小时，在体视显微镜(Nikon SMZ25，日本)下观察并用配套拍摄系统拍照，待鱼体全长超出体视镜拍摄范围后，改用数码相机(Canon SX60HS，日本)拍照，每次拍摄内容包括仔鱼全身照、头部侧面照、头部腹面照以及口吸盘局部照。90 d后口吸盘结构逐渐发育完善，各区域乳突数量变化较大，辅以扫描电子显微镜观察，具体操作：用戊二醛固定液固定，置于4℃冰箱保存。使用扫描电子显微镜(JSM-6510LV，日本)观察前一天置于–80℃超低温冰箱保存，24 h后取出，抽真空并进行喷铂处理，随后使用扫描电子显微镜观察云南盘口吸盘形态结构。

选取发育完整的云南盘口吸盘进行组织切片，主要观察口吸盘上乳突、味蕾等分布情况。用Bouin氏液固定，梯度酒精脱水，石蜡包埋，Leica RM2235(德国)切片机切片，切片厚度为5~7 μm，苏木精–伊红(H.E)染色，Nikon Eclipse 80i (日本)显微摄像系统观察并拍照。

使用Image-Pro Plus 6.0图像分析软件测量相关数据，Microsoft Excel 2010、SPSS 18.0软件对数据进行统计分析，Adobe PhotoShop CS6、Microsoft PowerPoint 2010软件对图片进行处理。所有统计值均以平均值±标准误(Mean±SE)表示。

该时期云南盘口部形态变化不大，口吸盘尚未形成。上下唇在口角处相连并不断向后延伸，口角须、吻须出现，吻皮前端下包，口经历了从亚下位到端位、再到亚下位的过程。

初孵仔鱼(0 d)口凹形成(图 1-1)，口角沟向后可达眼前缘正下方，上颌略长于下颌。此时，云南盘仔鱼呈黄色透明状，卵黄较大(图 1-2)。出膜6 d，上下颌位于头部最前端，口端位，上下唇开始向后延伸(图 1-3)。出膜16 d，口角须原基出现，颐部表皮开始逐渐隆起，形成口吸盘的主体部分，包括中央肉质垫与马蹄形隆起(图 1-4和图 1-5)。出膜26 d，上下唇不断向后延伸，吻须原基出现(图 1-6)。

图 1(Fig. 1)

图 1 云南盘口吸盘形态学观察 Fig.1 Observation of the sucking disc of D. yunnanensis with stereoscopic microscope 1~2：初孵仔鱼；3：出膜6 d；4~5：出膜16 d；6：出膜26 d；7：出膜45 d；8：出膜60 d；9：出膜75 d；10：出膜80 d；11：出膜90 d腹视图；12：出膜105 d；13：出膜135 d；14：出膜165 d腹视图；15：成鱼；CP：中央肉质垫；GR：肉突；HS：马蹄形隆起；LJ：下颌；LL：下唇；LP：侧突；MB：口角须；RB：吻须；RF：吻皮；UL：上唇 1~2: Newly hatched larvae; 3: 6th day after hatching; 4~5: 16th day after hatching; 6: 26th day after hatching; 7: 45th day after hatching; 8: 60th day after hatching; 9: 75th day after hatching; 10: 80th day after hatching; 11: 90th day after hatching (ventral view); 12: 105th day after hatching; 13: 135th day after hatching; 14: 165th day after hatching (ventral view); 15: Adult fish; CP: Central pad; GR: Granulation; HS: Horse-shoe swollen; LJ: Lower jaw; LL: Lower lip; LP: Lateral projection; MB: Maxillary barbel; RB: Rostral barbel; RF: Rostral fold; UL: Upper lip

该时期口吸盘原基出现，肉突和侧突隆起，马蹄形隆起与中央肉质垫之间出现缢痕，吻皮与马蹄形隆起最先出现乳突，中央肉质垫游离缘和侧突也先后出现乳突，吻皮边缘由于成排隆起的乳突而呈流苏状。最终，上唇退化，下唇瓣、肉突、侧突与吸盘主体逐渐愈合呈一体，但愈合部位仍具有缺刻，整个吸盘后缘呈三叶状，口吸盘雏形形成。

出膜45 d，口亚下位，口角须长约400 μm，吻须稍短，约200 μm，吻皮边缘流苏不明显，口吸盘原基形成，吸盘主体与下唇瓣之间形成肉突隆起，中央肉质垫两侧各形成一侧突(图 1-7)。出膜60 d，口下位，吻皮下包并盖过上唇，中央肉质垫后缘游离，马蹄形隆起，雏形形成。下唇中段逐渐拉伸断裂形成"唇突"，为了与口吸盘上乳突区分，下唇形成下唇突，上唇则形成上唇突(图 1-8)。出膜75 d，中央肉质垫游离缘呈圆弧形，微上翘，两侧缢痕逐渐加深；吻皮与马蹄形隆起，最先出现乳突，吻皮边缘流苏不明显(图 1-9)。出膜80 d，吻皮边缘乳突有2~3排，肉质垫上乳突少量分布，侧突上无乳突(图 1-10)。出膜90 d，上唇退化，紧包在上颌基部。下唇瓣、肉突、侧突与吸盘主体逐渐愈合，但愈合处仍存在缺刻(图 1-11)。

该时期是口吸盘结构完善的过程，各区域乳突数量变化最终定型，口吸盘后缘缺刻消失，表明口吸盘发育完整。

出膜105 d，马蹄形隆起区域乳突3~4排，其两侧各具1个无乳突分布区(图 1-12)。

出膜135 d，吸盘游离缘更后伸，后缘缺刻变小，但愈痕仍可见，中央肉质垫上的乳突集中分布在后缘，其分布区呈顶角向前的三角形(图 1-13和图 2-1)，中部乳突相对较少，前部形成一个很小的无乳突区域；下唇中段拉伸断裂，形成独立的唇突(图 2-2)，但仍有部分唇突两两相连(图 2-3)。除吻皮具有不带棘爪结构的乳突外，口吸盘其他部位的乳突基本都具有数量不等的棘爪，且乳突棘爪会随着磨损而脱落，并不断更新(图 2-4)。中央肉质垫上的乳突棘爪无统一的弯曲朝向(图 2-5)，而吻皮、唇瓣以及马蹄形隆起乳突的棘爪弯曲方向具有一致性，均朝口部弯曲(图 2-6~8)。

图 1(Fig. 1)

图 2 云南盘口吸盘扫描电子显微镜观察 Fig.2 Observation of the sucking disc of D. yunnanensis with scanning electron microscope 1：口吸盘；2：独立的下唇突；3：两两相连的下唇突；4：中央肉质垫乳突(a：完整的乳突；b：完全磨损脱落的乳突；c：仅顶部棘爪磨损脱落的乳突)；5：中央肉质垫后缘乳突；6：吻皮乳突与味蕾；7：马蹄形隆起乳突棘爪；8：马蹄形隆起乳突棘爪放大；9：吻须顶部；10：吻须上的味蕾；11：口角须表面孔洞；CP：中央肉质垫；HS：马蹄形隆起；LL：下唇；LP：侧突；Ma：乳突；MB：口角须；RB：吻须；RF：吻皮；TB：味蕾；UJ：上颌 1: Sucking disc; 2: Independent protuberance of lower lip; 3: Two connected protuberance of lower lip; 4: The mastoid on central pad (a: Complete mastoid; b: The mastoid that wears off completely; c: The mastoid that only the top pawl wears off); 5: The posterior mastoid of central pad; 6: Mastoid and taste bud on rostral fold; 7: The pawl of mastoid on horse-shoe swollen; 8: Enlarged view of the pawl of mastoid on horse-shoe swollen; 9: Top of rostral barbel; 10: The taste bud on rostral barbel; 11: The hole in the maxillary barbel surface; CP: Central pad; HS: Horse-shoe swollen; LL: Lower lip; LP: Lateral projection; Ma: Mastoid; MB: Maxillary barbel; RB: Rostral barbel; RF: Rostral fold; TB: Taste bud; UJ: Upper jaw

出膜165 d，缺刻消失，吸盘后缘呈光滑的圆弧，口吸盘发育完整(图 1-14)，基本和成鱼相似(图 1-15)。吻须与口角须上均有味蕾突起(图 2-9和图 2-10)，整个表面布满指纹状的Malpighian细胞，其微嵴排列密集而规则，微嵴细胞之间有较多孔洞(图 2-11)，Malpighian细胞在吻皮、下颌、吸盘外侧缘表面等同样存在。

对出膜150~157 d的云南盘稚鱼口吸盘进行组织切片(图 3-1)，发现味蕾主要分布于须(吻须和口角须)、吻皮、唇突、口角处和中央肉质垫。吻皮内侧靠近上唇处无味蕾，吻皮外侧前端有较多味蕾与乳突分布(图 3-2和图 3-3)。口角须与吻须结构类似，前端分布有大量味蕾，基部较少(图 3-4和图 3-5)，口角须基部至口角处有较多味蕾分布(图 3-6)。上下颌缘均角质化，由砾石状的角细胞镶嵌排列形成，角细胞之间具微隙，内侧为排列致密的上皮细胞带(图 3-7和图 3-8)，着生在下颌基部的唇突上有味蕾和Malpighian细胞分布(图 3-9)。中央肉质垫前部乳突稀疏，味蕾较少；后部味蕾较多，往往夹杂在乳突中间，平均直径为30 μm左右(图 3-10)。马蹄形隆起两侧和中央肉质垫前端的无乳突分布区无味蕾分布，但有大量的Malpighian细胞。

图 1(Fig. 1)

图 3 云南盘口吸盘组织学观察 Fig.3 Histological observation of the sucking disc of D. yunnanensis 1：口吸盘(纵切)；2：吻皮(纵切)；3：吻皮(横切)；4：口角须前端(纵切)；5：口角须前端(横切)；6：口角处味蕾(纵切)；7：上下颌缘角质鞘(纵切)；8：角质鞘放大(纵切)；9：下唇突上味蕾(纵切)；10：中央肉质垫游离缘(纵切)；CM：粘液细胞；CP：中央肉质垫；HS：马蹄形隆起；LJ：下颌；LL：下唇；Ma：乳突；RF：吻皮；TB：味蕾；UJ：上颌；UL：上唇 1: Complete sucking disc (longitudinal cutting); 2: Rostral fold (longitudinal cutting); 3: Rostral fold (crosscutting); 4: Top of maxillary barbel (longitudinal cutting); 5: Top of maxillary barbel (crosscutting); 6: The taste bud on corner of the mouth (longitudinal cutting); 7: Keratinized sheath of upper jaw and lower jaw (longitudinal cutting); 8: Enlarged view of keratinized sheath (longitudinal cutting); 9: The taste bud on protuberance of lower lip (longitudinal cutting); 10: Free margin of central pad (longitudinal cutting); CM: Cellular mucipara; CP: Central pad; HS: Horse-shoe swollen; LJ: Lower jaw; LL: Lower lip; Ma: Mastoid; RF: Rostral fold; TB: Taste bud; UJ: Upper jaw; UL: Upper lip

周伟等(1993a)根据野外所采集标本的形态差异划分成5个时期(早期、马蹄隆起期、雏形前期、雏形期和成形期)。本研究基于人工繁殖的云南盘仔鱼开展实验，连续记录口吸盘的发育情况，将口吸盘的发育时期划分为3个。根据体长进行推算，本研究的口吸盘形成前期大致包括了周伟等(1993a)所划分的早期(17~26 mm)，此时口吸盘尚未出现、吻皮开始下包、吻须和口角须均形成；口吸盘形成期大致包括了马蹄隆起期(20~29 mm)和雏形前期(29~31 mm)，此时，马蹄形隆起和中央肉质垫均已形成、乳突增多；口吸盘完善期大致包括了雏形期(34~47 mm)和成形期(> 42 mm)，此时，完整的口吸盘雏形形成、后缘缺刻消失、乳突分布基部定型。本研究中的划分方法避免了各时期之间的鱼在体长上存在重叠交叉的情况，便于对口吸盘发育过程有更清晰的认识。同时，能观察到某一结构的连续变化过程，避免了对不同时期存在形态差异的结构产生错误识别。有研究者将唇突称为马蹄形隆起之前的"前周缘薄片"(伍献文, 1977)。也有研究者认为，该薄片是下颌基部与马蹄形隆起之间的丘状突起行(周伟等, 1993a)。但在本研究中，通过对口吸盘发育的连续观察发现，所谓的"前周缘薄片"和"丘状突起行"实际是下唇逐渐拉伸断裂形成的"唇突"，有些唇突为独立突起，但仍有部分唇突两两相连，形成断断续续的突起行。

本研究的云南盘仔稚鱼是在静水中养殖的，是否流水养殖会促进口吸盘的发育进程，需要进一步研究。

为适应急流环境，云南盘特化出口吸盘结构，与之相似的特化结构还有很多，如四川华吸鳅(Sinogastromyzon szechuanensis)腹鳍左右联合而形成吸盘状(吴金明等, 2011)；无斑褶(Pseudecheneis immaculatus)胸部平扁，有卵圆形的吸着器(李斌等, 2010)，这些特化均是结构、功能与环境相适应的结果。观察发现，云南盘中央肉质垫上的乳突棘爪无统一弯曲方向且磨损最为严重，这可能与中央肉质垫相对于溪石表面的摩擦方向并不固定有关。在吸附过程中，中央肉质垫可以来回向腹面凸出和向背面凹入(周伟等, 1993a)。此时，与吸附面接触的乳突棘爪向四周张开或向中心聚拢；在吸附前进过程中，乳突棘爪在张开和聚拢的同时还进行前后蠕动，以此起辅助推进作用。因此，乳突棘爪的运动方向不固定，最终导致棘爪的弯曲方向不同。除中央肉质垫外，其余各部乳突棘爪弯曲方向均具有一致性，即均朝口部方向弯曲。但通过观察发现，新形成的棘爪并没有统一的弯曲方向，而在成熟乳突上普遍存在棘爪柄扭曲旋转的现象，说明乳突棘爪的弯曲方向并不是先天形成的，而是在发育过程中，由于口吸盘的吸附运动作用，棘爪与溪石表面产生摩擦或者水流冲击所形成。

棘爪弯曲方向与口吸盘的往复抽提运动有关，而口吸盘的抽提行为又与口的开闭有关。云南盘口张开闭合是一个用时极短的过程，通过高速相机观察，1龄鱼每秒钟可开闭7~11次。从腹面观察，当云南盘口张开时，中央肉质垫向背面内凹，当口闭合时，中央肉质垫向腹面外凸，在往复抽提的过程中，口吸盘与吸附面之间压强减小，形成真空吸附，使得口吸盘紧贴溪石等物体表面，以此来抵御流水的冲击。

在口吸盘吸附前进的过程中，云南盘可利用颌部铲刮吸附面上的着生藻类，其往往会对同一片区域刮食多次，之后会通过胸鳍及尾鳍的摆动改变前进的方向(赛林霖等, 2006)或脱离溪石表面另外寻找新的取食区域。在此过程中，少不了味觉器官——味蕾的参与(苏锦祥, 1980)。云南盘口部有大量味蕾分布，主要分布在须、吻皮、唇突、口角和中央肉质垫等处。其中，须上的味蕾在发现和觅取食物的过程中发挥重要作用(郑文彪等, 1992; 潘鸿春等, 1994; Valentincic et al, 2005)。须上味蕾主要分布在尖部，后呈递减趋势，这与Aguirre等(2000)在鲻(Mullus barbatus)口须味蕾分布模式的研究一致。由于云南盘口唇结构的特殊性，吻皮下包盖住退化的上唇，因此，吻皮可能行使上唇的部分功能，在摄食过程中更精确地确定食物位置、触发对食物的"咬食"反射作用(王永翠, 2012)。唇突和口角处的味蕾在铲刮食物的过程中承担着最初的"品尝"任务，并最终决定是否继续进行摄食行为(周伟等, 1993a)。