TY - JOUR ID - TI - 魁蚶C型凝集素基因cDNA的克隆及表达分析 AU - 沈淑芳 AU - 朱 玲 AU - 李加琦 AU - 薛素燕 AU - 李 阳 AU - 陈琼琳 AU - 毛玉泽 AU - 庄志猛 AU - 方建光 VL - 39 IS - 1 PB - 中国水产科学研究院黄海水产研究所 SP - 128 EP - 136 PY - JF - 渔业科学进展 JA - UR - http://journal.yykxjz.cn/yykxjz/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20161221001&flag=1 KW - C型凝集素;魁蚶;鳗弧菌;基因克隆;基因表达 KW - C-type lectin; Scapharca broughtonii; Vibrio anguillarum; Gene clone; Gene expression AB - 通过cDNA末端快速扩增(Rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术克隆得到魁蚶(Scapharca broughtonii) C型凝集素(C-type lectin,Sb-Lec1)基因,该基因全长为700 bp,其中,5′-UTR为29 bp,3′-UTR为167 bp,开放阅读框长度为504 bp,编码167个氨基酸,包括长度为23个氨基酸的信号肽序列、129个氨基酸的糖识别结构域(CRD)以及参与二硫键形成的6个半胱氨酸。预测蛋白分子量为19.11 kDa,理论等电点为4.74。多序列比对结果显示,Sb-Lec1基因CRD编码的氨基酸序列与长牡蛎(Crassostrea gigas)、紫贻贝(Mytilus galloprovincialis)和海湾扇贝(Argopecten irradians) C型凝集素的同源性分别为38%~40%、34%~35%和38%~39%,Sb-Lec1基因编码的氨基酸序列与其他物种的凝集素基因具有相似的结构,均含有形成二硫键的4个保守半胱氨酸。系统进化分析结果显示,魁蚶先与贝类聚为一支,再与脊椎动物聚在一起,表明魁蚶Sb-Lec1基因在进化树上的位置与其传统分类所处位置一致。采用荧光定量PCR技术,检测了Sb-Lec1基因在组织中的表达情况,发现其在肝胰腺、血淋巴、鳃、外套膜、闭壳肌、斧足中均有表达,其中,肝胰腺表达量最高。同时,分析了Sb-Lec1基因在鳗弧菌(Vibrio anguillarum)刺激下的mRNA表达量变化情况。结果显示,与对照组相比,菌刺激组Sb-Lec1基因mRNA在各检测组织中的表达量均显著上调(P<0.05),随着刺激时间的延长,表达量呈先升高后降低的趋势。本研究表明,魁蚶Sb-Lec1基因在机体免疫防御方面发挥重要功能。 ER -