《渔业科学进展》虚拟专辑——水生生物病害研究前沿：病原、检测与防控技术专题
2025, 46(1):161-182.
DOI: 10.19663/j.issn2095-9869.20241024002
摘要:
本文综述了生物安保在水产养殖业中的重要性及其对推动产业绿色高质量发展的作用。生物安保作为一种基于风险分析的战略性综合方法，其核心目标在于防控疫病风险，保障行业健康和可持续发展。文章首先阐述了生物安保的概念和发展历史，讨论了这一概念与生物安全、疫病防控和健康养殖、动物卫生等概念的联系与差别，并提出生物安保、动物卫福和生态干预构成动物卫生三要素，探讨了生物安保体系构建的六大要素和生物安保计划的实施流程。随后，概述了生物安保概念所涉及的关键科学技术问题，介绍了国内外相关科技和政策领域的研究发展现状。接下来，文章讨论了全球和区域性组织在推动水产养殖生物安保战略中的作用，以及不同国家和地区在水产养殖生物安保法规体系构建方面的实践，特别介绍了联合国粮食及农业组织(FAO)和世界动物卫生组织(WOAH)等国际组织重视运用生物安保理念来推动水产养殖的可持续发展。文章进一步讨论了水产养殖企业生物安保分级及其技术内容，以无特定病原(SPF)虾苗培育为例介绍了国外企业生物安保的发展，描述了水产养殖企业生物安保体系构建方法和在对虾育苗场的实践。最后，文章重点指出了中国在水产养殖生物安保方面的挑战和机遇，展望了生物安保战略的发展方向，包括构建国家生物安保中长期发展战略的路线图、强化生物安保相关的研究与教育普及，优先发展种业生物安保，构建高标准生物安保水平上的种业体系，以保障中国水产养殖业的绿色高质量发展。
本文综述了生物安保在水产养殖业中的重要性及其对推动产业绿色高质量发展的作用。生物安保作为一种基于风险分析的战略性综合方法，其核心目标在于防控疫病风险，保障行业健康和可持续发展。文章首先阐述了生物安保的概念和发展历史，讨论了这一概念与生物安全、疫病防控和健康养殖、动物卫生等概念的联系与差别，并提出生物安保、动物卫福和生态干预构成动物卫生三要素，探讨了生物安保体系构建的六大要素和生物安保计划的实施流程。随后，概述了生物安保概念所涉及的关键科学技术问题，介绍了国内外相关科技和政策领域的研究发展现状。接下来，文章讨论了全球和区域性组织在推动水产养殖生物安保战略中的作用，以及不同国家和地区在水产养殖生物安保法规体系构建方面的实践，特别介绍了联合国粮食及农业组织(FAO)和世界动物卫生组织(WOAH)等国际组织重视运用生物安保理念来推动水产养殖的可持续发展。文章进一步讨论了水产养殖企业生物安保分级及其技术内容，以无特定病原(SPF)虾苗培育为例介绍了国外企业生物安保的发展，描述了水产养殖企业生物安保体系构建方法和在对虾育苗场的实践。最后，文章重点指出了中国在水产养殖生物安保方面的挑战和机遇，展望了生物安保战略的发展方向，包括构建国家生物安保中长期发展战略的路线图、强化生物安保相关的研究与教育普及，优先发展种业生物安保，构建高标准生物安保水平上的种业体系，以保障中国水产养殖业的绿色高质量发展。
2024, 45(2):257-266.
DOI: 10.19663/j.issn2095-9869.20221211002
摘要:
2021年，山东省临沂市一养殖场养殖的美洲鲥鱼(Alosa sapidissima)突发疾病并出现严重死亡，日死亡率高峰期达到2.5%，累积死亡率约为90%。患病鱼主要症状为体表出血、溃疡，解剖可见腹腔腹水、肝脏暗红，并伴有肠炎。组织病理学检测发现，病鱼肝脏出现弥散性坏死，嗜碱性粒细胞增多和细胞肿胀空泡变性；脾脏出现出血性贫血性坏死灶、核破裂和核固缩；肾脏淋巴细胞坏死脱落，肾小体毛细血管球萎缩，近端小管和远端小管内的细胞出现不同程度的细胞结构消失。发病鱼肉眼和显微镜观察未见明显寄生虫，利用PCR方法检测鲤疱疹病毒2型(Cyprinid herpesvirus 2)、鲈鱼蛙病毒(largemouth bass ranavirus)等淡水鱼类常见病毒均为阴性。细菌分离培养结果显示，从发病鱼的肝脏、肾脏和脾脏中分离得到形态一致的优势菌，命名为AS-AH2101。经16S rRNA测序比对和生理生化鉴定，确定AS-AH2101为嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)。毒力基因检测结果显示，AS-AH2101携带气溶素(aerA)、溶血素(hlyA)、丝氨酸蛋白酶(ahpA)、热稳定细胞肠毒素(ast)、热敏感细胞肠毒素(altA)和密度感应系统(luxS)基因。人工感染实验结果显示，AS-AH2101能引起蓝曼龙(Trichogaster trichopterus)发病死亡，半数致死量为3.23×104 CFU/尾。药物敏感性研究表明，AS-AH2101对头孢拉啶、阿莫西林、氨苄西林和红霉素等4种抗生素具有耐药性，对四环素和多西环素等11种抗生素敏感。综上所述，本研究报道了我国养殖美洲鲥鱼感染嗜水气单胞菌的典型病例，为美洲鲥鱼在我国养殖过程中的疾病防控以及嗜水气单胞菌病的防治提供了参考和借鉴。
2021年，山东省临沂市一养殖场养殖的美洲鲥鱼(Alosa sapidissima)突发疾病并出现严重死亡，日死亡率高峰期达到2.5%，累积死亡率约为90%。患病鱼主要症状为体表出血、溃疡，解剖可见腹腔腹水、肝脏暗红，并伴有肠炎。组织病理学检测发现，病鱼肝脏出现弥散性坏死，嗜碱性粒细胞增多和细胞肿胀空泡变性；脾脏出现出血性贫血性坏死灶、核破裂和核固缩；肾脏淋巴细胞坏死脱落，肾小体毛细血管球萎缩，近端小管和远端小管内的细胞出现不同程度的细胞结构消失。发病鱼肉眼和显微镜观察未见明显寄生虫，利用PCR方法检测鲤疱疹病毒2型(Cyprinid herpesvirus 2)、鲈鱼蛙病毒(largemouth bass ranavirus)等淡水鱼类常见病毒均为阴性。细菌分离培养结果显示，从发病鱼的肝脏、肾脏和脾脏中分离得到形态一致的优势菌，命名为AS-AH2101。经16S rRNA测序比对和生理生化鉴定，确定AS-AH2101为嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)。毒力基因检测结果显示，AS-AH2101携带气溶素(aerA)、溶血素(hlyA)、丝氨酸蛋白酶(ahpA)、热稳定细胞肠毒素(ast)、热敏感细胞肠毒素(altA)和密度感应系统(luxS)基因。人工感染实验结果显示，AS-AH2101能引起蓝曼龙(Trichogaster trichopterus)发病死亡，半数致死量为3.23×104 CFU/尾。药物敏感性研究表明，AS-AH2101对头孢拉啶、阿莫西林、氨苄西林和红霉素等4种抗生素具有耐药性，对四环素和多西环素等11种抗生素敏感。综上所述，本研究报道了我国养殖美洲鲥鱼感染嗜水气单胞菌的典型病例，为美洲鲥鱼在我国养殖过程中的疾病防控以及嗜水气单胞菌病的防治提供了参考和借鉴。
2023, 44(3):235-244.
DOI: 10.19663/j.issn2095-9869.20221011001
摘要:
急性肝胰腺坏死病(AHPND)是对虾养殖过程中最常见、最严重的疾病，给对虾养殖造成重大经济损失。AHPND病原种类多、基因型复杂，现有的针对不同病原的检测技术目标导向较弱、检测成本高、时间消耗长，对虾健康养殖亟待开发AHPND的精准快速诊断技术。本研究针对AHPND病原体携带编码一种二元毒素pirA和pirB大型质粒的遗传共性，基于pirA和pirB基因设计特异性引物并建立微流控荧光定量PCR检测方法。该方法对致病基因pirA和pirB特异性强、灵敏度高，最低检测限分别为5.43×100和4.31×101 copies/μL，样品平均检测时间为26 min左右。为进一步评估该方法在实际应用中的准确性，以含有pirA和pirB毒性质粒的副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)进行人工感染实验。结果表明，感染后的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)鳃丝、肝胰腺、肠道和肌肉等组织随时间的推迟均能检测到pirA和pirB；从感染2 h的结果来看，pirB比pirA检出率更高。此外，致病因子pirA和pirB比toxR的检出率更高，更适合对AHPND致病原的检测。本研究建立的微流控荧光定量PCR检测的方法具有快速、灵敏、高通量、污染少、现场检测、一体化集成等优点。该技术不仅适用于实验室，更符合养殖基层的现场快速检测需求，为及早认知疾病发生风险和病害精准防控提供了新的技术手段与理论支撑。
急性肝胰腺坏死病(AHPND)是对虾养殖过程中最常见、最严重的疾病，给对虾养殖造成重大经济损失。AHPND病原种类多、基因型复杂，现有的针对不同病原的检测技术目标导向较弱、检测成本高、时间消耗长，对虾健康养殖亟待开发AHPND的精准快速诊断技术。本研究针对AHPND病原体携带编码一种二元毒素pirA和pirB大型质粒的遗传共性，基于pirA和pirB基因设计特异性引物并建立微流控荧光定量PCR检测方法。该方法对致病基因pirA和pirB特异性强、灵敏度高，最低检测限分别为5.43×100和4.31×101 copies/μL，样品平均检测时间为26 min左右。为进一步评估该方法在实际应用中的准确性，以含有pirA和pirB毒性质粒的副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)进行人工感染实验。结果表明，感染后的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)鳃丝、肝胰腺、肠道和肌肉等组织随时间的推迟均能检测到pirA和pirB；从感染2 h的结果来看，pirB比pirA检出率更高。此外，致病因子pirA和pirB比toxR的检出率更高，更适合对AHPND致病原的检测。本研究建立的微流控荧光定量PCR检测的方法具有快速、灵敏、高通量、污染少、现场检测、一体化集成等优点。该技术不仅适用于实验室，更符合养殖基层的现场快速检测需求，为及早认知疾病发生风险和病害精准防控提供了新的技术手段与理论支撑。
2023, 44(5):172-181.
DOI: 10.19663/j.issn2095-9869.20220404001
摘要:
青蟹呼肠孤病毒(mud crab reovirus, MCRV)是养殖拟穴青蟹(Scylla paramamosain)致死率最高的病原之一，青蟹种蟹及其幼体携带该病原对青蟹养殖产业的高质量发展造成了重大威胁。为从源头切断该病原的感染和传播，本研究研发了一种筛选无MCRV种蟹的荧光定量检测方法。为最大限度地提高检测灵敏性，首先，本研究分析MCRV在感染青蟹主要组织中的含量，发现血淋巴中病毒载量最高；随后，分析该病毒的13个预测基因在血淋巴中的表达水平，发现病毒VP11基因相对表达量最高；最后，基于VP11基因序列保守区设计特异引物，建立了一种SYBR Green quantitative reverse-transcription PCR (qRT-PCR)检测方法，该方法可精确检测的病毒下限为50 copies/反应。该检测方法具有组织和靶标基因选择优势，灵敏性显著高于早期报道的其他检测方法。使用该方法对含有5种常见甲壳动物病原的样品进行检测，均无特异性扩增。抽取微量血淋巴(大约50 µL/只)提取RNA，随后使用该检测方法对22只种蟹和20只市售青蟹进行MCRV检测，阳性率分别54.44%和85.00%。此外，利用该方法进一步分析了MCRV在较低温度下(21 ℃)在青蟹体内的增殖情况，发现病毒感染早期MCRV呈指数方式增殖，随后进入平台期，实验周期内无青蟹死亡。总之，本研究建立了一种灵敏性高、实用性强的MCRV检测方法，既可用于微创条件下无MCRV种蟹筛选，也能满足病原感染相关研究的需要。
青蟹呼肠孤病毒(mud crab reovirus, MCRV)是养殖拟穴青蟹(Scylla paramamosain)致死率最高的病原之一，青蟹种蟹及其幼体携带该病原对青蟹养殖产业的高质量发展造成了重大威胁。为从源头切断该病原的感染和传播，本研究研发了一种筛选无MCRV种蟹的荧光定量检测方法。为最大限度地提高检测灵敏性，首先，本研究分析MCRV在感染青蟹主要组织中的含量，发现血淋巴中病毒载量最高；随后，分析该病毒的13个预测基因在血淋巴中的表达水平，发现病毒VP11基因相对表达量最高；最后，基于VP11基因序列保守区设计特异引物，建立了一种SYBR Green quantitative reverse-transcription PCR (qRT-PCR)检测方法，该方法可精确检测的病毒下限为50 copies/反应。该检测方法具有组织和靶标基因选择优势，灵敏性显著高于早期报道的其他检测方法。使用该方法对含有5种常见甲壳动物病原的样品进行检测，均无特异性扩增。抽取微量血淋巴(大约50 µL/只)提取RNA，随后使用该检测方法对22只种蟹和20只市售青蟹进行MCRV检测，阳性率分别54.44%和85.00%。此外，利用该方法进一步分析了MCRV在较低温度下(21 ℃)在青蟹体内的增殖情况，发现病毒感染早期MCRV呈指数方式增殖，随后进入平台期，实验周期内无青蟹死亡。总之，本研究建立了一种灵敏性高、实用性强的MCRV检测方法，既可用于微创条件下无MCRV种蟹筛选，也能满足病原感染相关研究的需要。
2023, 44(2):174-185.
DOI: 10.19663/j.issn2095-9869.20210930001
摘要:
牡蛎疱疹病毒(Ostreid herpesvirus 1, OsHV-1)给世界双壳贝类养殖业造成了严重的经济损失。10余种双壳贝类陆续被认定为易感宿主，仍有其他几种贝类仅有PCR核酸阳性数据，因确诊证据不足导致其易感性未得到充分评估。原位环介导等温核酸扩增(LAMP)检测技术相对传统原位杂交技术具有灵敏度高、方便快捷、可作为病原微生物感染证据的优点。为了在OsHV-1流行病学调查过程中实现病毒感染的快速检测和确诊，根据已报道的OsHV-1特异性LAMP检测引物，设计内引物，优化反应条件，建立了OsHV-1的原位LAMP检测方法。基于该方法对2019年以来采集的长牡蛎(Crassostrea gigas)、福建牡蛎(Crassostrea angulata)、栉孔扇贝(Chlamys farreri)、虾夷扇贝(Mizuhopecten yessoensis)、毛蚶(Scapharca subcrenata)和菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)样本进行检测。结果显示，毛蚶样本的OsHV-1原位LAMP检测结果呈阳性；其他几种贝类部分样本的实时定量PCR (qPCR)检测呈阳性，但原位LAMP检测呈阴性。对毛蚶样本的原位LAMP检测结果分析发现，病毒杂交信号主要分布在外套膜和肝胰腺等器官的结缔组织，推测感染的细胞为成纤维细胞和血淋巴细胞；在闭壳肌和斧足肌肉组织的肌细胞细胞核中也发现较多杂交信号。鳃丝内和周边偶现阳性信号，推测来自渗出的血淋巴细胞。基于原位LAMP技术的OsHV-1检测结果显示，毛蚶是OsHV-1的一种易感宿主，毛蚶结缔组织、肌肉组织和血淋巴细胞对该病毒有强亲嗜性。
牡蛎疱疹病毒(Ostreid herpesvirus 1, OsHV-1)给世界双壳贝类养殖业造成了严重的经济损失。10余种双壳贝类陆续被认定为易感宿主，仍有其他几种贝类仅有PCR核酸阳性数据，因确诊证据不足导致其易感性未得到充分评估。原位环介导等温核酸扩增(LAMP)检测技术相对传统原位杂交技术具有灵敏度高、方便快捷、可作为病原微生物感染证据的优点。为了在OsHV-1流行病学调查过程中实现病毒感染的快速检测和确诊，根据已报道的OsHV-1特异性LAMP检测引物，设计内引物，优化反应条件，建立了OsHV-1的原位LAMP检测方法。基于该方法对2019年以来采集的长牡蛎(Crassostrea gigas)、福建牡蛎(Crassostrea angulata)、栉孔扇贝(Chlamys farreri)、虾夷扇贝(Mizuhopecten yessoensis)、毛蚶(Scapharca subcrenata)和菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)样本进行检测。结果显示，毛蚶样本的OsHV-1原位LAMP检测结果呈阳性；其他几种贝类部分样本的实时定量PCR (qPCR)检测呈阳性，但原位LAMP检测呈阴性。对毛蚶样本的原位LAMP检测结果分析发现，病毒杂交信号主要分布在外套膜和肝胰腺等器官的结缔组织，推测感染的细胞为成纤维细胞和血淋巴细胞；在闭壳肌和斧足肌肉组织的肌细胞细胞核中也发现较多杂交信号。鳃丝内和周边偶现阳性信号，推测来自渗出的血淋巴细胞。基于原位LAMP技术的OsHV-1检测结果显示，毛蚶是OsHV-1的一种易感宿主，毛蚶结缔组织、肌肉组织和血淋巴细胞对该病毒有强亲嗜性。
2024, 45(4):146-154.
DOI: 10.19663/j.issn2095-9869.20230215002
摘要:
2013年以来，我国沿海各省市养殖对虾中先后出现虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei, EHP)感染且感染率居高不下，使我国虾类养殖产业遭受了严重经济损失。为查明2021—2022年沿海省市养殖虾类中EHP的流行情况，本研究在沿海地区开展了养殖虾类EHP流行情况调查，共采集样品936份，并采用TaqMan实时荧光定量PCR (TaqMan qPCR)和组织病理检测对样品进行分析。TaqMan qPCR检测结果表明，2021和2022年所采集的虾类样品中，EHP的阳性检出率分别为10.67% (54/506)和13.72% (59/430)；2021和2022年主要在凡纳对虾(Penaeus vannamei)中检出EHP阳性，阳性检出率分别为14.10% (54/383)和16.71% (58/347)，且检出EHP阳性的凡纳对虾主要来自山东、辽宁、广东、河北和天津等省市；1份脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)样品中检出EHP阳性，罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)、克氏原螯虾(Protocrayfish cruzi)、斑节对虾(P. monodon)、日本对虾(P. japonicus)和中国对虾(P. chinensis)等虾类样品中未检出EHP阳性。对TaqMan qPCR检测呈阳性的凡纳对虾进行组织病理检测，在其肝胰腺上皮细胞中观测到分散或成簇的EHP孢子以及处于生长阶段的EHP原质团。本研究表明，2021—2022年EHP仍在我国沿海地区养殖的凡纳对虾中流行，尽管其流行率较前几年呈下降趋势，但其对凡纳对虾养殖产业的危害仍不容忽视。
2013年以来，我国沿海各省市养殖对虾中先后出现虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei, EHP)感染且感染率居高不下，使我国虾类养殖产业遭受了严重经济损失。为查明2021—2022年沿海省市养殖虾类中EHP的流行情况，本研究在沿海地区开展了养殖虾类EHP流行情况调查，共采集样品936份，并采用TaqMan实时荧光定量PCR (TaqMan qPCR)和组织病理检测对样品进行分析。TaqMan qPCR检测结果表明，2021和2022年所采集的虾类样品中，EHP的阳性检出率分别为10.67% (54/506)和13.72% (59/430)；2021和2022年主要在凡纳对虾(Penaeus vannamei)中检出EHP阳性，阳性检出率分别为14.10% (54/383)和16.71% (58/347)，且检出EHP阳性的凡纳对虾主要来自山东、辽宁、广东、河北和天津等省市；1份脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)样品中检出EHP阳性，罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)、克氏原螯虾(Protocrayfish cruzi)、斑节对虾(P. monodon)、日本对虾(P. japonicus)和中国对虾(P. chinensis)等虾类样品中未检出EHP阳性。对TaqMan qPCR检测呈阳性的凡纳对虾进行组织病理检测，在其肝胰腺上皮细胞中观测到分散或成簇的EHP孢子以及处于生长阶段的EHP原质团。本研究表明，2021—2022年EHP仍在我国沿海地区养殖的凡纳对虾中流行，尽管其流行率较前几年呈下降趋势，但其对凡纳对虾养殖产业的危害仍不容忽视。
2024, 45(3):193-202.
DOI: 10.19663/j.issn2095-9869.20221216001
摘要:
传染性皮下和造血组织坏死病毒(infectious hypodermal and haematopoietic necrosis virus, IHHNV)是危害虾类健康养殖的重要病原，为寻找一种快捷保存及分离IHHNV DNA的方法，为后续研究提供完整的核酸材料，选用FTA (flinders technology associates)卡为保存介质，以FTA纯化试剂、TE (Tris-EDTA)缓冲液及去离子水为基础洗脱液，设计7种FTA卡黏附DNA洗脱方法，通过荧光定量PCR检测方法检验不同核酸洗脱分离效果及最低的点膜核酸量。结果显示，于4 mm2的FTA卡上，点样体积为2.5 μL，用洗脱液作为模板时，最低点膜核酸浓度需要1.47×104 copies/μL以上，可获得最佳的检测灵敏度和100%检出率的洗膜方法为50 μL TE缓冲液于95 ℃下浸洗5 min；用膜片做模板，点膜核酸浓度需要1.82×103 copies/μL以上，室温(20~25 ℃)条件下，用FTA纯化试剂洗脱3次，再用TE缓冲液洗脱2次，洗脱时间均为5 min，可获得最佳的检测灵敏度和100%的准确度。以FTA卡保存对虾白斑综合征病毒(white spot syndrome virus, WSSV)、虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei, EHP)、虾十足目虹彩病毒1 (Decapod iridescent virus 1, DIV1)、偷死野田村病毒(covert mortality noda virus, CMNV)、致急性肝胰腺坏死副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus, VpAHPND)核酸，测试所建洗脱方法的效果，证实了该方法对其他虾类病原核酸的洗脱具有通用性。该研究给出了FTA卡保存和洗脱IHHNV DNA的适用性方案，为野外对虾样品采集、病毒核酸样品跨区域传递的保存和运输条件提供了科学数据。
传染性皮下和造血组织坏死病毒(infectious hypodermal and haematopoietic necrosis virus, IHHNV)是危害虾类健康养殖的重要病原，为寻找一种快捷保存及分离IHHNV DNA的方法，为后续研究提供完整的核酸材料，选用FTA (flinders technology associates)卡为保存介质，以FTA纯化试剂、TE (Tris-EDTA)缓冲液及去离子水为基础洗脱液，设计7种FTA卡黏附DNA洗脱方法，通过荧光定量PCR检测方法检验不同核酸洗脱分离效果及最低的点膜核酸量。结果显示，于4 mm2的FTA卡上，点样体积为2.5 μL，用洗脱液作为模板时，最低点膜核酸浓度需要1.47×104 copies/μL以上，可获得最佳的检测灵敏度和100%检出率的洗膜方法为50 μL TE缓冲液于95 ℃下浸洗5 min；用膜片做模板，点膜核酸浓度需要1.82×103 copies/μL以上，室温(20~25 ℃)条件下，用FTA纯化试剂洗脱3次，再用TE缓冲液洗脱2次，洗脱时间均为5 min，可获得最佳的检测灵敏度和100%的准确度。以FTA卡保存对虾白斑综合征病毒(white spot syndrome virus, WSSV)、虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei, EHP)、虾十足目虹彩病毒1 (Decapod iridescent virus 1, DIV1)、偷死野田村病毒(covert mortality noda virus, CMNV)、致急性肝胰腺坏死副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus, VpAHPND)核酸，测试所建洗脱方法的效果，证实了该方法对其他虾类病原核酸的洗脱具有通用性。该研究给出了FTA卡保存和洗脱IHHNV DNA的适用性方案，为野外对虾样品采集、病毒核酸样品跨区域传递的保存和运输条件提供了科学数据。
2024, 45(4):175-186.
DOI: 10.19663/j.issn2095-9869.20230226002
摘要:
为了筛选可用于防治虾苗细菌性玻化症(bacterial vitrified syndrome, BVS)的中药复方，本研究首先通过牛津杯法和二倍稀释法进行体外抑菌实验，从50种中药中筛选出对BVS致病菌溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)和副溶血弧菌(V. parahaemolyticus)具有良好抑菌效果的中药。然后，以不同浓度的溶藻弧菌浸浴感染虾苗，建立BVS病理模型；再通过体内药效学实验从死亡率、组织病理学和超微组织病理学角度比较不同中药复方对于患BVS虾苗的防治效果。体外抑菌实验结果显示，五味子(Schisandrae chinensis fructus)、马鞭草(Verbenae herba)、乌梅(Mume fructus)等中药对溶藻弧菌的抑菌圈直径可达12 mm以上；诃子(Chebulae fructus)、五味子、牡丹皮(Moutan cortex)等中药对副溶血弧菌的抑菌圈直径可达13 mm以上。五倍子(Galla chinensis)、诃子、五味子、丁香(Caryophylli flos)对溶藻弧菌和副溶血弧菌的最小抑菌浓度(MIC)均≤12.5 mg/mL，最小杀菌浓度(MBC)均≤50 mg/mL。结合香附(Cyperi rhizoma)、栀子(Gardeniae fructus) 2味中药组成3种中药复方，处方1、处方2和处方3；以5×104 CFU/mL的溶藻弧菌感染虾苗成功建立BVS病理模型，在此基础上采用药物治疗患病虾苗7 d，各组死亡率由低至高依次为空白对照组、处方1组、20%氟苯尼考粉对照组、处方3组、处方2组和阳性对照组。处方1组虾苗死亡率显著低于阳性对照组(P<0.05)；处方2组、处方3组和20%氟苯尼考对照组虾苗死亡率低于阳性对照组，但差异不显著(P>0.05)。由此可见，处方1可显著降低患病虾苗死亡率。组织病理学和超微组织病理学研究显示，相比于其他感染组，处方1组虾苗肝胰腺病变程度明显较轻，肠道结构较为完整；虾苗肝小管上皮细胞的细胞膜、细胞核正常，线粒体、内质网丰富且基本正常。表明口服处方1可对患病虾苗的肝胰腺和肠道组织起到良好的保护作用，并优于处方2、处方3和20%氟苯尼考粉。综上所述，处方1 (诃子30 g、五味子20 g、香附20 g)对溶藻弧菌感染的虾苗保护和治疗效果良好。本研究结果可为研制防控虾苗BVS专用中药提供依据，助力对虾养殖绿色高质量发展。
为了筛选可用于防治虾苗细菌性玻化症(bacterial vitrified syndrome, BVS)的中药复方，本研究首先通过牛津杯法和二倍稀释法进行体外抑菌实验，从50种中药中筛选出对BVS致病菌溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)和副溶血弧菌(V. parahaemolyticus)具有良好抑菌效果的中药。然后，以不同浓度的溶藻弧菌浸浴感染虾苗，建立BVS病理模型；再通过体内药效学实验从死亡率、组织病理学和超微组织病理学角度比较不同中药复方对于患BVS虾苗的防治效果。体外抑菌实验结果显示，五味子(Schisandrae chinensis fructus)、马鞭草(Verbenae herba)、乌梅(Mume fructus)等中药对溶藻弧菌的抑菌圈直径可达12 mm以上；诃子(Chebulae fructus)、五味子、牡丹皮(Moutan cortex)等中药对副溶血弧菌的抑菌圈直径可达13 mm以上。五倍子(Galla chinensis)、诃子、五味子、丁香(Caryophylli flos)对溶藻弧菌和副溶血弧菌的最小抑菌浓度(MIC)均≤12.5 mg/mL，最小杀菌浓度(MBC)均≤50 mg/mL。结合香附(Cyperi rhizoma)、栀子(Gardeniae fructus) 2味中药组成3种中药复方，处方1、处方2和处方3；以5×104 CFU/mL的溶藻弧菌感染虾苗成功建立BVS病理模型，在此基础上采用药物治疗患病虾苗7 d，各组死亡率由低至高依次为空白对照组、处方1组、20%氟苯尼考粉对照组、处方3组、处方2组和阳性对照组。处方1组虾苗死亡率显著低于阳性对照组(P<0.05)；处方2组、处方3组和20%氟苯尼考对照组虾苗死亡率低于阳性对照组，但差异不显著(P>0.05)。由此可见，处方1可显著降低患病虾苗死亡率。组织病理学和超微组织病理学研究显示，相比于其他感染组，处方1组虾苗肝胰腺病变程度明显较轻，肠道结构较为完整；虾苗肝小管上皮细胞的细胞膜、细胞核正常，线粒体、内质网丰富且基本正常。表明口服处方1可对患病虾苗的肝胰腺和肠道组织起到良好的保护作用，并优于处方2、处方3和20%氟苯尼考粉。综上所述，处方1 (诃子30 g、五味子20 g、香附20 g)对溶藻弧菌感染的虾苗保护和治疗效果良好。本研究结果可为研制防控虾苗BVS专用中药提供依据，助力对虾养殖绿色高质量发展。
2023, 44(5):137-152.
DOI: 10.19663/j.issn2095-9869.20220424002
摘要:
为了解自噬相关基因Atg2在克氏原螯虾(Procambarus clarkia)先天免疫中的作用，本研究克隆了克氏原螯虾Atg2 (PcAtg2)基因全长序列。生物信息学分析显示，PcAtg2蛋白编码序列全长为9 966 bp，推测其编码2 189个氨基酸。组织定量表达分布显示，PcAtg2在克氏原螯虾的各个组织中均有表达，其中在肝胰腺中表达最高，在眼柄中表达最低。在白斑综合征病毒(WSSV)感染实验中，PcAtg2基因表达量在不同组织中均呈现显著上调趋势。RNA干扰(RNAi)实验显示，PcAtg2基因沉默后，WSSV在克氏原螯虾体内的增殖明显被抑制，同时，自噬相关基因的表达量上调。透射电镜分析结果显示，在WSSV感染后，PcAtg2基因沉默组中克氏原螯虾肝胰腺组织中的自噬小体多于对照组。本研究结果可为了解克氏原螯虾应对WSSV胁迫下的调控机制提供理论参考。
为了解自噬相关基因Atg2在克氏原螯虾(Procambarus clarkia)先天免疫中的作用，本研究克隆了克氏原螯虾Atg2 (PcAtg2)基因全长序列。生物信息学分析显示，PcAtg2蛋白编码序列全长为9 966 bp，推测其编码2 189个氨基酸。组织定量表达分布显示，PcAtg2在克氏原螯虾的各个组织中均有表达，其中在肝胰腺中表达最高，在眼柄中表达最低。在白斑综合征病毒(WSSV)感染实验中，PcAtg2基因表达量在不同组织中均呈现显著上调趋势。RNA干扰(RNAi)实验显示，PcAtg2基因沉默后，WSSV在克氏原螯虾体内的增殖明显被抑制，同时，自噬相关基因的表达量上调。透射电镜分析结果显示，在WSSV感染后，PcAtg2基因沉默组中克氏原螯虾肝胰腺组织中的自噬小体多于对照组。本研究结果可为了解克氏原螯虾应对WSSV胁迫下的调控机制提供理论参考。
2024, 45(3):171-181.
DOI: 10.19663/j.issn2095-9869.20221124002
摘要:
为预报池塘养殖凡纳对虾(Penaeus vannamei)急性肝胰腺坏死病(AHPND)的发生，自2020年开始，笔者对凡纳对虾养殖区开展了连续监测工作，包括与疾病发生相关的环境理化因子、微生物因子、虾体自身健康状况等18个候选预警因子指标，通过数据标准化处理后分析病原、宿主与环境之间的相关性，对候选预警因子进行筛选，基于Python语言编程结合Deep Forest、LightGBM、XGBoost算法进行数据建模和预测性能评判，仿真环境为Python2.7，以预警因子指标作为输入样本(即警兆)，以对虾是否发病指标作为输出结果(即警情)，根据输入样本和输出结果各自建立输入数据矩阵和目标数据矩阵，利用原始数据矩阵对输入样本进行初始化，结合函数方程进行拟合，拟合的源代码能利用已知环境、病原及对虾免疫指标数据对目标警情进行预测。最终建立了基于Deep Forest算法的虾体(肝胰腺内)细菌总数、虾体弧菌(Vibrio)占比、水体细菌总数和盐度的4维向量预警预报模型，准确率达89.00%。本研究将人工智能算法应用到对虾AHPND发生的预测预报，相关研究结果为对虾AHPND疾病预警预报建立了预警数学模型，并为对虾健康养殖和疾病防控提供了技术支撑和有力保障。
为预报池塘养殖凡纳对虾(Penaeus vannamei)急性肝胰腺坏死病(AHPND)的发生，自2020年开始，笔者对凡纳对虾养殖区开展了连续监测工作，包括与疾病发生相关的环境理化因子、微生物因子、虾体自身健康状况等18个候选预警因子指标，通过数据标准化处理后分析病原、宿主与环境之间的相关性，对候选预警因子进行筛选，基于Python语言编程结合Deep Forest、LightGBM、XGBoost算法进行数据建模和预测性能评判，仿真环境为Python2.7，以预警因子指标作为输入样本(即警兆)，以对虾是否发病指标作为输出结果(即警情)，根据输入样本和输出结果各自建立输入数据矩阵和目标数据矩阵，利用原始数据矩阵对输入样本进行初始化，结合函数方程进行拟合，拟合的源代码能利用已知环境、病原及对虾免疫指标数据对目标警情进行预测。最终建立了基于Deep Forest算法的虾体(肝胰腺内)细菌总数、虾体弧菌(Vibrio)占比、水体细菌总数和盐度的4维向量预警预报模型，准确率达89.00%。本研究将人工智能算法应用到对虾AHPND发生的预测预报，相关研究结果为对虾AHPND疾病预警预报建立了预警数学模型，并为对虾健康养殖和疾病防控提供了技术支撑和有力保障。
2024, 45(3):182-192.
DOI: 10.19663/j.issn2095-9869.20230211001
摘要:
美人鱼发光杆菌美人鱼亚种(Photobacterium damselae subsp. damselae, PDD)是广泛分布于全球海洋环境中的一种致病菌。本研究以实验室保存的一株高致病性PDD菌株(PDD1608)作为对象，初步探究毒力基因dly对PDD菌株的生物学特性和致病力的影响。利用λRed重组技术成功构建毒力基因dly缺失株Δdly PDD1608::Cm，比较野生株和缺失株的生长、涌动性、药物敏感性、生理生化特性、生物被膜形成能力、菌株及胞外产物(extracellular products, ECP)的溶血性和磷脂酶活性等生物学特性。选用海水青鳉鱼(Oryzias melastigma)作为实验动物，通过人工感染实验测定野生株和缺失株及其ECP对海水青鳉鱼的致病性。结果显示，毒力基因dly缺失后导致PDD菌株生长变慢，涌动性、溶血性和磷脂酶活性均降低；野生株和缺失株的药物敏感性和生理生化特性未产生变化；与野生株相比，缺失株的生物被膜形成能力有显著差异(P<0.05)；人工感染实验表明，缺失株及其ECP对海水青鳉鱼的致病性降低。毒力基因dly影响PDD菌株的生长、涌动性、溶血性和磷脂酶活性等多种生物学特性，并且与PDD菌株及其ECP的致病力强弱密切相关。
美人鱼发光杆菌美人鱼亚种(Photobacterium damselae subsp. damselae, PDD)是广泛分布于全球海洋环境中的一种致病菌。本研究以实验室保存的一株高致病性PDD菌株(PDD1608)作为对象，初步探究毒力基因dly对PDD菌株的生物学特性和致病力的影响。利用λRed重组技术成功构建毒力基因dly缺失株Δdly PDD1608::Cm，比较野生株和缺失株的生长、涌动性、药物敏感性、生理生化特性、生物被膜形成能力、菌株及胞外产物(extracellular products, ECP)的溶血性和磷脂酶活性等生物学特性。选用海水青鳉鱼(Oryzias melastigma)作为实验动物，通过人工感染实验测定野生株和缺失株及其ECP对海水青鳉鱼的致病性。结果显示，毒力基因dly缺失后导致PDD菌株生长变慢，涌动性、溶血性和磷脂酶活性均降低；野生株和缺失株的药物敏感性和生理生化特性未产生变化；与野生株相比，缺失株的生物被膜形成能力有显著差异(P<0.05)；人工感染实验表明，缺失株及其ECP对海水青鳉鱼的致病性降低。毒力基因dly影响PDD菌株的生长、涌动性、溶血性和磷脂酶活性等多种生物学特性，并且与PDD菌株及其ECP的致病力强弱密切相关。
2024, 45(5):195-203.
DOI: 10.19663/j.issn2095-9869.20230601002
摘要:
由偷死野田村病毒(covert mortality nodavirus, CMNV)引起的虾类病毒性偷死病(viral covert mortality disease, VCMD)使对虾养殖产业遭受了严重的损失。为掌握近年CMNV在我国主要养殖虾类中的流行情况，本研究2021—2022年间在全国主要虾类养殖地区开展了CMNV流行病学调查和样品采集工作，利用分子生物学、组织病理学和电镜分析等方法对所采集的样品进行了系统分析。期间，从天津、山东、江苏、海南、湖北及新疆等地共采集1 299份样品，样品种类包括凡纳对虾(Penaeus vannamei)、罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)、日本对虾(P. japonicus)、中国对虾(P. chinensis)和克氏原螯虾(Procambarus clarkia)等主要养殖虾类以及养殖池塘中的共生生物。采用TaqMan探针实时荧光定量PCR (TaqMan RT-qPCR)对所采集的样品进行CMNV检测，结果表明，凡纳对虾、罗氏沼虾和日本对虾等主要养殖虾类中均可检测到CMNV阳性，阳性样品采集地包括山东、江苏、海南、新疆、广西和天津等省市；除养殖虾类外，采集的虾类鲜活饵料以及虾类养殖池塘共生生物包括沙蚕(Perinereis aibuhitensis)和卤虫(Artemia sinica)中也可检测到CMNV阳性。2021年和2022年所采集样品中CMNV阳性检出率分别为10.04% (69/687)和11.44% (70/612)。流行病学调查发现，室外池塘养殖对虾中CMNV感染会引起一定程度的累计死亡，室内养殖对虾中CMNV感染主要引起对虾甲壳软化和生长缓慢，通常不会导致其大量死亡。对TaqMan RT-qPCR检测呈阳性的样品进行组织病理和原位杂交分析，患病虾肝胰腺和前中肠盲囊组织中可见嗜酸性病毒包涵体，附肢神经可见空泡化病理损伤，这些发生病理损伤的组织中均有明显CMNV RNA探针紫色杂交信号。本研究结果表明，我国多地养殖虾类以及养殖池塘共生生物中仍存在较高的CMNV阳性检出率，该病毒的流行危害风险仍然较高。建议在甲壳类养殖过程中加强CMNV检测与监测预警，进一步降低其扩散和流行的风险。
由偷死野田村病毒(covert mortality nodavirus, CMNV)引起的虾类病毒性偷死病(viral covert mortality disease, VCMD)使对虾养殖产业遭受了严重的损失。为掌握近年CMNV在我国主要养殖虾类中的流行情况，本研究2021—2022年间在全国主要虾类养殖地区开展了CMNV流行病学调查和样品采集工作，利用分子生物学、组织病理学和电镜分析等方法对所采集的样品进行了系统分析。期间，从天津、山东、江苏、海南、湖北及新疆等地共采集1 299份样品，样品种类包括凡纳对虾(Penaeus vannamei)、罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)、日本对虾(P. japonicus)、中国对虾(P. chinensis)和克氏原螯虾(Procambarus clarkia)等主要养殖虾类以及养殖池塘中的共生生物。采用TaqMan探针实时荧光定量PCR (TaqMan RT-qPCR)对所采集的样品进行CMNV检测，结果表明，凡纳对虾、罗氏沼虾和日本对虾等主要养殖虾类中均可检测到CMNV阳性，阳性样品采集地包括山东、江苏、海南、新疆、广西和天津等省市；除养殖虾类外，采集的虾类鲜活饵料以及虾类养殖池塘共生生物包括沙蚕(Perinereis aibuhitensis)和卤虫(Artemia sinica)中也可检测到CMNV阳性。2021年和2022年所采集样品中CMNV阳性检出率分别为10.04% (69/687)和11.44% (70/612)。流行病学调查发现，室外池塘养殖对虾中CMNV感染会引起一定程度的累计死亡，室内养殖对虾中CMNV感染主要引起对虾甲壳软化和生长缓慢，通常不会导致其大量死亡。对TaqMan RT-qPCR检测呈阳性的样品进行组织病理和原位杂交分析，患病虾肝胰腺和前中肠盲囊组织中可见嗜酸性病毒包涵体，附肢神经可见空泡化病理损伤，这些发生病理损伤的组织中均有明显CMNV RNA探针紫色杂交信号。本研究结果表明，我国多地养殖虾类以及养殖池塘共生生物中仍存在较高的CMNV阳性检出率，该病毒的流行危害风险仍然较高。建议在甲壳类养殖过程中加强CMNV检测与监测预警，进一步降低其扩散和流行的风险。
2025, 46(3):183-193.
DOI: 10.19663/j.issn2095-9869.20240322002
摘要:
后口虫病是近年来影响刺参(Apostichopus japonicus)养殖效益的重要病害种类之一。唇形后口虫(Boveria labialis)是刺参后口虫病的病原。由于缺乏针对该物种的快速、准确的检测方法，研究人员难以系统解析该病原体的传播途径。本研究以测序获得的唇形后口虫部分线粒体基因组序列为基础，根据nad10基因序列设计唇形后口虫引物，建立其SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法，并对刺参不同养殖区和不同养殖模式下养殖系统中唇形后口虫载量进行检测分析。结果显示，设计的唇形后口虫引物在质粒标准品4.05×101~4.05×109 copies/µL范围内建立的标准曲线具有良好的线性关系，相关系数R2=0.997，熔解曲线呈现单一峰，无引物二聚体或非特异性扩增；灵敏度实验最低检测限为40.5 copies/µL；所设计的引物仅对唇形后口虫出现特异性扩增，对海洋尾丝虫(Uronema marinum)、贪食纤口虫(Chaenea vorax)、僧帽肾形虫(Colpoda cucullus)和多小核草履虫(Paramecium multi-micronuleatum)无交叉反应；重复性实验中各浓度的批内和批间Ct值均一性较高，批内实验变异系数(CV)值为0.32%~0.82%，批间实验CV值为0.40%~0.88%，稳定性较好。利用本方法对4种刺参养殖模式不同养殖区的环境样品和饲料进行检测，结合镜检结果对比分析发现，海水中唇形后口虫DNA载量与刺参体内唇形后口虫量呈中度正相关(R=0.563)，底泥、附着物样品中的唇形后口虫DNA载量与刺参体内唇形后口虫量呈高度正相关(R=0.931)。推测，鲜海泥是唇形后口虫传播的重要载体之一。本研究结果可为唇形后口虫的快速检测、传播途径解析和防控提供参考。
后口虫病是近年来影响刺参(Apostichopus japonicus)养殖效益的重要病害种类之一。唇形后口虫(Boveria labialis)是刺参后口虫病的病原。由于缺乏针对该物种的快速、准确的检测方法，研究人员难以系统解析该病原体的传播途径。本研究以测序获得的唇形后口虫部分线粒体基因组序列为基础，根据nad10基因序列设计唇形后口虫引物，建立其SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法，并对刺参不同养殖区和不同养殖模式下养殖系统中唇形后口虫载量进行检测分析。结果显示，设计的唇形后口虫引物在质粒标准品4.05×101~4.05×109 copies/µL范围内建立的标准曲线具有良好的线性关系，相关系数R2=0.997，熔解曲线呈现单一峰，无引物二聚体或非特异性扩增；灵敏度实验最低检测限为40.5 copies/µL；所设计的引物仅对唇形后口虫出现特异性扩增，对海洋尾丝虫(Uronema marinum)、贪食纤口虫(Chaenea vorax)、僧帽肾形虫(Colpoda cucullus)和多小核草履虫(Paramecium multi-micronuleatum)无交叉反应；重复性实验中各浓度的批内和批间Ct值均一性较高，批内实验变异系数(CV)值为0.32%~0.82%，批间实验CV值为0.40%~0.88%，稳定性较好。利用本方法对4种刺参养殖模式不同养殖区的环境样品和饲料进行检测，结合镜检结果对比分析发现，海水中唇形后口虫DNA载量与刺参体内唇形后口虫量呈中度正相关(R=0.563)，底泥、附着物样品中的唇形后口虫DNA载量与刺参体内唇形后口虫量呈高度正相关(R=0.931)。推测，鲜海泥是唇形后口虫传播的重要载体之一。本研究结果可为唇形后口虫的快速检测、传播途径解析和防控提供参考。
2023, 44(2):186-195.
DOI: 10.19663/j.issn2095-9869.20220426001
摘要:
生物防治广泛用于农作物的病害防治，该方法在藻类病害防控方面尚未有相关的报道。腐霉(Pythium sp.)是引起紫菜(Neopyropia)赤腐病(red rot disease)的主要病原，本研究的目的是筛选和鉴定对紫菜腐霉有拮抗能力的细菌。从养殖藻类及其养殖环境中分离鉴定了385株细菌，通过平板对峙法筛选到9株对腐霉有拮抗作用的细菌，进一步通过含毒介质法筛选到3株胞外产物对腐霉具有抑制活性的细菌(P3、P6和P19)。3株拮抗菌对8株腐霉均有拮抗活性，对腐霉生长的抑制率分别为52.09%~97.95% (P3)、26.81%~78.04% (P6)、10.47%~41.91% (P19)。通过16S rRNA鉴定和多位点序列进化分析(16S rRNA-dnaA-dnaN-recA)，将P3和P6鉴定为杀鱼假交替单胞菌(Pseudoalteromonas piscicida)，P19鉴定为解肽假交替单胞菌(Pseudoalteromonas peptidolytica)。本研究筛选得到的拮抗菌为下一步建立紫菜赤腐病的生物防治方法奠定了基础。
生物防治广泛用于农作物的病害防治，该方法在藻类病害防控方面尚未有相关的报道。腐霉(Pythium sp.)是引起紫菜(Neopyropia)赤腐病(red rot disease)的主要病原，本研究的目的是筛选和鉴定对紫菜腐霉有拮抗能力的细菌。从养殖藻类及其养殖环境中分离鉴定了385株细菌，通过平板对峙法筛选到9株对腐霉有拮抗作用的细菌，进一步通过含毒介质法筛选到3株胞外产物对腐霉具有抑制活性的细菌(P3、P6和P19)。3株拮抗菌对8株腐霉均有拮抗活性，对腐霉生长的抑制率分别为52.09%~97.95% (P3)、26.81%~78.04% (P6)、10.47%~41.91% (P19)。通过16S rRNA鉴定和多位点序列进化分析(16S rRNA-dnaA-dnaN-recA)，将P3和P6鉴定为杀鱼假交替单胞菌(Pseudoalteromonas piscicida)，P19鉴定为解肽假交替单胞菌(Pseudoalteromonas peptidolytica)。本研究筛选得到的拮抗菌为下一步建立紫菜赤腐病的生物防治方法奠定了基础。
2025, 46(3):212-221.
DOI: 10.19663/j.issn2095-9869.20240312002
摘要:
研究没食子酸对溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)的抑菌活性和机理。通过测定没食子酸对溶藻弧菌的最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC)和生长曲线，研究没食子酸对溶藻弧菌的抑菌活性；测定不同浓度的没食子酸溶液与溶藻弧菌作用前后，菌液上清液中碱性磷酸酶(AKP)活性、电导率，溶藻弧菌生物被膜、运动性和聚集能力的变化，研究没食子酸对溶藻弧菌的抗菌机理。结果显示，没食子酸对溶藻弧菌的MIC和MBC分别为4 mg/mL和8 mg/mL。没食子酸能破坏溶藻弧菌的细胞壁，增加其细胞膜通透性，抑制生物被膜的形成，清除成熟的生物被膜，抑制溶藻弧菌的运动和聚集能力。本研究为探明没食子酸抑制溶藻弧菌的作用机理奠定了良好的基础，为其防治水生动物溶藻弧菌感染性疾病提供了理论依据。
研究没食子酸对溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)的抑菌活性和机理。通过测定没食子酸对溶藻弧菌的最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC)和生长曲线，研究没食子酸对溶藻弧菌的抑菌活性；测定不同浓度的没食子酸溶液与溶藻弧菌作用前后，菌液上清液中碱性磷酸酶(AKP)活性、电导率，溶藻弧菌生物被膜、运动性和聚集能力的变化，研究没食子酸对溶藻弧菌的抗菌机理。结果显示，没食子酸对溶藻弧菌的MIC和MBC分别为4 mg/mL和8 mg/mL。没食子酸能破坏溶藻弧菌的细胞壁，增加其细胞膜通透性，抑制生物被膜的形成，清除成熟的生物被膜，抑制溶藻弧菌的运动和聚集能力。本研究为探明没食子酸抑制溶藻弧菌的作用机理奠定了良好的基础，为其防治水生动物溶藻弧菌感染性疾病提供了理论依据。
2014, 35(4):1-6.
DOI: 10.11758/yykxjz.20140401
摘要:
为了解南海鸢乌贼(Sthenototeuthis oualaniensis)资源量与分布状况，本研究利用建立在灯光罩网船上的北斗星通渔业信息采集网络，搜集南海鸢乌贼生产数据，并根据灯光罩网作业特点，创建了光诱资源量评估模型，使用克里金插值法，绘制出南海鸢乌贼的分布密度图，估计其总资源量和年可捕量。研究结果表明，鸢乌贼在南海有着广泛的分布，以110.5°–111.5°E、11°–12°N之间的海域和115.5°–116.5°E、9.5°–11.5°N之间的海域资源密度最高，在4 t/km2以上；以112°–112.5°E、14.5°–15°N之间的海域和113°–115°E、15°–16.5°N之间的海域单位努力量渔获量(CPUE)最高，达1 kg/(kW•d•km2)以上。根据克里金插值法估算，在南海108°–118°E、9°–20°N之间的359个渔区，鸢乌贼资源量为204.94万t，总可捕量为99.40万t。评估认为，南海鸢乌贼资源开发潜力大，是未来南沙渔业开发的主要种类。
为了解南海鸢乌贼(Sthenototeuthis oualaniensis)资源量与分布状况，本研究利用建立在灯光罩网船上的北斗星通渔业信息采集网络，搜集南海鸢乌贼生产数据，并根据灯光罩网作业特点，创建了光诱资源量评估模型，使用克里金插值法，绘制出南海鸢乌贼的分布密度图，估计其总资源量和年可捕量。研究结果表明，鸢乌贼在南海有着广泛的分布，以110.5°–111.5°E、11°–12°N之间的海域和115.5°–116.5°E、9.5°–11.5°N之间的海域资源密度最高，在4 t/km2以上；以112°–112.5°E、14.5°–15°N之间的海域和113°–115°E、15°–16.5°N之间的海域单位努力量渔获量(CPUE)最高，达1 kg/(kW•d•km2)以上。根据克里金插值法估算，在南海108°–118°E、9°–20°N之间的359个渔区，鸢乌贼资源量为204.94万t，总可捕量为99.40万t。评估认为，南海鸢乌贼资源开发潜力大，是未来南沙渔业开发的主要种类。
2014, 35(4):7-12.
DOI: 10.11758/yykxjz.20140402
摘要:
为研究崂山湾人工鱼礁区浮游植物群落结构与环境因子的关系，于2011年3、6、9、12月对崂山湾3个人工鱼礁区(峰山区、仰口区、港东区)进行取样调查。4次采样共鉴定浮游植物69种，其中3、9、12月优势种都为甲藻门中的中肋骨条藻(Skeletonema costatum)，并且9月鱼礁区浮游植物密度远大于其他月份浮游植物密度。应用Canoco for Windows 4.5软件对获得的浮游植物数据和环境因子数据进行典范对应分析(Canonical correspondence analysis), 作出物种与环境因子关系的二维排序图。结果表明, 影响礁区浮游植物分布的主要环境因子依次为磷酸盐、温度、硅酸盐。
为研究崂山湾人工鱼礁区浮游植物群落结构与环境因子的关系，于2011年3、6、9、12月对崂山湾3个人工鱼礁区(峰山区、仰口区、港东区)进行取样调查。4次采样共鉴定浮游植物69种，其中3、9、12月优势种都为甲藻门中的中肋骨条藻(Skeletonema costatum)，并且9月鱼礁区浮游植物密度远大于其他月份浮游植物密度。应用Canoco for Windows 4.5软件对获得的浮游植物数据和环境因子数据进行典范对应分析(Canonical correspondence analysis), 作出物种与环境因子关系的二维排序图。结果表明, 影响礁区浮游植物分布的主要环境因子依次为磷酸盐、温度、硅酸盐。
2014, 35(2):22-29.
DOI: 10.11758/yykxjz.20140204
摘要:
为充分利用渔船采集的声学数据，基于Echoview渔业声学数据后处理软件的相关功能模块，建立了一种强干扰背景下的回波映像集群信号提取方法，并针对2011年2月在南奥克尼群岛周边水域采集的南极磷虾集群数据进行了应用研究，有效消除了回声数据中的强干扰信号。还原后的磷虾集群数据显示，南极磷虾集群具有明显的昼夜垂直移动特征，白天虾群几何中心分布水层的平均深度为41.2 m，虾群平均厚度为10.8 m；夜间分布水层变浅，平均深度为41.2 m，平均厚度为8.8 m。
为充分利用渔船采集的声学数据，基于Echoview渔业声学数据后处理软件的相关功能模块，建立了一种强干扰背景下的回波映像集群信号提取方法，并针对2011年2月在南奥克尼群岛周边水域采集的南极磷虾集群数据进行了应用研究，有效消除了回声数据中的强干扰信号。还原后的磷虾集群数据显示，南极磷虾集群具有明显的昼夜垂直移动特征，白天虾群几何中心分布水层的平均深度为41.2 m，虾群平均厚度为10.8 m；夜间分布水层变浅，平均深度为41.2 m，平均厚度为8.8 m。
