2. 农业农村部海洋渔业可持续发展 重点实验室 中国水产科学研究院黄海水产研究所 青岛 266071;
3. 莱州明波水产有限公司 烟台 261418
2. Key Laboratory of Sustainable Development of Marine Fisheries, Ministry of Agriculture and Rural Affairs, Yellow Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Qingdao 266071;
3. Laizhou Mingbo Aquatic Co. Ltd, Yantai 261418
石斑鱼属于鲈形目(Perciformes)、
关于石斑鱼肌肉营养成分分析有较多研究,如七带石斑鱼(Epinephelus septemfasciatus)、棕点石斑鱼(E. fuscoguttatus)、鞍带石斑鱼(E. lanceol)、龙虎石斑鱼(E. fuscoguttatus ♀×E. lanceolatus ♂)、美洲黑石斑鱼(Centropristis striata)、点带石斑鱼(E. malabaricua)、赤点石斑鱼(E. akaara)的肌肉营养成分与品质相关报道(程波等, 2009; 郭永军等, 2009; 黎祖褔等, 2008; 于宏等, 2014; 党冉等, 2010; 徐大为等, 2008; 孔祥迪等, 2016)。本研究对云纹石斑鱼、鞍带石斑鱼及其杂交新品系云龙石斑鱼的常规营养成分、氨基酸组成及矿物质含量进行了分析与评价,旨在为3种石斑鱼之间的营养优势是否可以顺利表达进行评估;为石斑鱼家族中杂交的合理性、可靠性进行评估;为提高人工养殖条件下的商品质量及配合饲料的研制提供基础数据和理论依据。
1 材料与方法 1.1 实验鱼云纹石斑鱼、云龙石斑鱼取自山东省莱州明波水产有限公司,鞍带石斑鱼(龙胆)由海南省海王星水产科技有限公司提供。每组取石斑鱼样10尾,分别测量体重和体长。云纹石斑鱼平均体重为(340.50±12.50) g、平均体长为(21.60±1.23) cm;鞍带石斑鱼平均体重为(297.05±14.60) g、平均体长为(20.10±1.50) cm;云龙石斑鱼平均体重为(320.60±20.48) g、平均体长为(21.70±0.53) cm。
1.2 样品处理样品鱼经MS-222麻醉后,测量体重和体长,洗净后解剖,每尾鱼自头背部两侧至尾柄前去皮后取肌肉样品。肌肉切小块等比例混合,用组织粉碎机搅碎、混匀,在-40℃条件下冷冻保存备用。肌肉组织样品送青岛市华测检测技术有限公司进行检测,每个样品检测2次。
1.3 测试项目与方法水分含量采用直接干燥法测定(GB 5009.3-2016);灰分测定采用马弗炉550℃高温灼烧法(GB 5009.4-2016);粗蛋白含量使用全自动凯氏定氮仪(GB 5009.5-2010)测定;粗脂肪含量采用索氏抽提法(GB/T 5009.6-2003)测定。氨基酸的测定依据GB/T 5009.124-2003,使用日立L-8800型氨基酸分析仪测定。采用GB/T 5009. (13、14、87、90、91、92)-2003和GB 5009.93-2010方法测定各种矿物质含量。
1.4 营养品质评价方法根据FAO/WHO 1973年建议的氨基酸评分标准模式(Pellet et al, 1980)和中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所提出的鸡蛋蛋白的氨基酸模式,计算3种石斑鱼的氨基酸评分(AAS)、化学评分(CS)及氨基酸的支芳值(F值)。公式如下:
$ \begin{array}{l} {\rm{AAS = }}\frac{{待测蛋白质中某种必需氨基酸含量({\rm mg/g N})}}{{FAO评分模式某种必需氨基酸含量({\rm mg/g N})}}\\ {\rm{CS = }}\frac{{待测蛋白质中某种必需氨基酸含量({\rm mg/g N})}}{{鸡蛋蛋白质中某种必需氨基酸含量({\rm mg/g N})}} \end{array} $ |
式中,氨基酸含量指每克氮中氨基酸的毫克数。
$ 氨基酸含量({\rm mg/g N})= \frac{{氨基酸含量\%(鲜样)}}{{粗蛋白含量\%(鲜样)}} \times 6.25 \times 1000 $ |
F值是支链氨基酸(BCAA)与芳香族氨基酸(AAA)的比值(黄薇等, 2014),公式如下:
F=(缬氨酸+亮氨酸+异亮氨酸)/(苯丙氨酸+酪氨酸)
1.5 数据处理与分析3种鱼各个营养成分的数值为每组混合肌肉样品重复测试获得数据的平均值,使用Excel 2013软件处理实验数据。
2 结果与分析 2.1 肌肉常规营养成分3种石斑鱼肌肉的常规营养成分见表 1。云纹石斑鱼、鞍带石斑鱼和云龙石斑鱼肌肉中粗蛋白含量分别为20.60%、19.30%和20.00%,粗脂肪的含量分别为2.60%、1.60%和4.30%。鞍带石斑鱼肌肉中的水分含量最高,为77.10%,云纹石斑鱼和云龙石斑鱼次之,分别为75.70%和74.40%。3种石斑鱼肌肉的灰分含量分别为1.30%、1.10%和1.20%。
3种石斑鱼肌肉氨基酸含量的测定结果见表 2。3种石斑鱼的肌肉共检测出16种常见氨基酸,包括7种必需氨基酸(Thr、Val、Met、Ile、Leu、Phe和Lys)、2种半必需氨基酸(His和Arg)和7种非必需氨基酸(Asp、Glu、Gly、Ala、Tyr、Pro和Ser)。其中,云纹石斑鱼氨基酸总量占肌肉鲜重的16.95%,必需氨基酸含量为7.11%,半必需氨基酸与非必需氨基酸分别占肌肉鲜重的1.59%和8.25%。鞍带石斑鱼氨基酸总量占肌肉鲜重的17.46%,必需氨基酸含量与云纹石斑鱼相近,为7.18%,半必需氨基酸与非必需氨基酸分别占肌肉鲜重的1.57%和8.71%。云龙石斑鱼肌肉中氨基酸总量为18.56%,必需氨基酸、半必需氨基酸和非必需氨基酸含量分别为7.69%、1.67%和9.20%。3种石斑鱼肌肉中必需氨基酸与总氨基酸的比值(WEAA/WTAA)均相近,分别为41.95%、41.12%和41.43%;必需氨基酸与非必需氨基酸含量的比值(WEAA/WNEAA),分别为72.26%、69.84%和70.75%。根据FAO/WHO的理想模式,质量较好的蛋白质,其组成氨基酸的WEAA/WTAA为40%左右,WEAA/WNEAA在60%以上(邴旭文等, 2005)。由此,3种石斑鱼肌肉氨基酸的组成比列均符合以上指标要求,其氨基酸具有良好的平衡性,属于优质的蛋白质源。
云纹石斑鱼肌肉的氨基酸中丙氨酸含量最高,为2.03%,其次为天冬氨酸(1.69%)、亮氨酸(1.62%)、赖氨酸(1.58%)。鞍带石斑鱼和云龙石斑鱼肌肉中的氨基酸均以谷氨酸含量最高(2.61%和2.73%),其次是天冬氨酸(1.98%和2.15%)、赖氨酸(1.72%和1.84%)、亮氨酸(1.54%和1.67%)。3种石斑鱼肌肉中含量较低的氨基酸均为以下4种:脯氨酸、组氨酸、蛋氨酸和酪氨酸。
2.2.2 肌肉必需氨基酸组成评价根据蛋白质评价标准,将3种石斑鱼肌肉中必需氨基酸含量转换为每克氮中所含氨基酸的毫克数(mg/g N),计算出3种石斑鱼肌肉各个必需氨基酸的AAS和CS分值(表 3)。由表 3可知,无论是以AAS还是CS为标准,3种石斑鱼的第一限制性氨基酸均为蛋氨酸,第二限制性氨基酸均为缬氨酸。云纹石斑鱼肌肉中必需氨基酸除蛋氨酸和缬氨酸外,其他各必需氨基酸的AAS均接近或大于1。以CS为标准,云纹石斑鱼蛋氨酸的CS最小,为0.44,其他各必需氨基酸的CS均大于0.6。鞍带石斑鱼和云龙石斑鱼肌肉中必需氨基酸除蛋氨酸外,其他各必需氨基酸的AAS均接近或大于1,CS均大于0.6。说明上述3种石斑鱼肌肉的必需氨基酸含量丰富,组成相对均衡。
由表 2可知,云纹石斑鱼、鞍带石斑鱼和云龙石斑鱼3种石斑鱼肌肉中鲜味氨基酸的含量分别为6.31%、6.83%和7.16%,分别占氨基酸总量(WDAA/WTAA)的37.23%、39.12%和38.58%。云纹石斑鱼肌肉的鲜味氨基酸中以丙氨酸含量最高,为2.03%,其次为天冬氨酸(1.69%)、甘氨酸(1.53%)、谷氨酸(1.06%)。鞍带石斑鱼和云龙石斑鱼肌肉中鲜味氨基酸含量的高低排序是一致的,均以谷氨酸含量最高,分别为2.61%和2.73%,其次为天冬氨酸(1.98%和2.15%)、丙氨酸(1.19%和1.24%)、甘氨酸(1.05%和1.04%)。
2.3 矿物元素含量分析3种石斑鱼肌肉中矿物质元素含量见表 4。常量元素中均为K的含量最高,分别为4450.00、3766.50和3490.50 mg/kg,在云纹石斑鱼和云龙石斑鱼肌肉中,其次为Mg(1210.50和1335.00 mg/kg)、Na(579.50和554.50 mg/kg)、P(203.00和183.00 mg/kg)、Ca(115.50和175.00 mg/kg);在鞍带石斑鱼肌肉中,其次为Mg(1137.00 mg/kg)、Na(904.50 mg/kg)、Ca(193.50 mg/kg)、P(183.00 mg/kg)。微量元素中,均是Zn的含量最高,分别为3.34、4.87和3.10 mg/kg,在云纹石斑鱼和鞍带石斑鱼肌肉中,其次为Fe (2.89和1.95 mg/kg)、Se(0.41和0.21 mg/kg)、Cu(0.10和0.15 mg/kg);在云龙石斑鱼肌肉中,其次为Fe (3.08 mg/kg)、Cu(0.35 mg/kg)、Se(0.30 mg/kg)。3种石斑鱼肌肉中的Mn均低于检出限。
鱼类营养价值的高低主要是由肌肉中蛋白质和脂肪的含量决定的。本研究中3种石斑鱼肌肉中粗蛋白含量均相对较高,分别为20.60%、19.30%、20.00%,均高于棕点石斑鱼(郭永军等, 2009)、点带石斑鱼(徐大为等, 2008)、淡水石斑鱼(Cichlasoma managuense) (黄海等, 2012)、赤点石斑鱼(林建斌等, 2010)、豹纹鳃棘鲈(Plectropomus leopardus)(尤宏争等, 2014)等多种石斑鱼的粗蛋白含量,与珍珠龙胆石斑鱼(王际英等, 2015)、七带石斑鱼(程波等, 2009)等石斑鱼的粗蛋白含量相近(表 1)。3种石斑鱼肌肉中粗脂肪的含量分别为2.60%、1.60%和4.30%,在一定范围内,鱼体肌肉脂肪的含量与肉质的风味呈正相关关系,脂肪含量在3.5%~4.5%具有良好的适口性(刘玉芳, 1991),说明云龙石斑鱼在适口性上优于前二者。本研究中的3种石斑鱼均是蛋白质含量丰富且脂肪含量相对适中的优质海水鱼类,其中,云纹石斑鱼肌肉中粗蛋白含量较后二者略高,而云龙石斑鱼肌肉的适口性较好。
3.2 氨基酸组成与营养品质 3.2.1 氨基酸组成食品中蛋白质营养价值的高低,主要取决于其所含氨基酸的组成与含量。在3种石斑鱼肌肉中均检测出16种常见氨基酸,氨基酸总量相差较大,分别为16.95%、17.46%和18.56%,可以看出,云龙石斑鱼氨基酸总量最高。三者的氨基酸总量均高于褐点石斑鱼(E. fuscoguttatus)(14.72%)、东星斑(Plectropomus leopardus)(14.4%)、斜带石斑鱼(E. coioides)(14.80%)(谢瑞涛等, 2016)、淡水石斑鱼(15.74%)(黄海等, 2012)等多种石斑鱼肌肉的氨基酸总量。
本研究发现,云纹石斑鱼肌肉的氨基酸中丙氨酸含量最高,占氨基酸总量的11.98%。丙氨酸可以增强鱼肉的鲜味,且具有预防肾结石、协助葡萄糖代谢的作用,有助于缓和低血糖,改善身体能量。鞍带石斑鱼和云龙石斑鱼肌肉的氨基酸均是谷氨酸含量最高,分别占氨基酸总量的14.95%和14.71%。谷氨酸在人体组织代谢过程中起解除氨毒害的作用(孙中武等, 2008),也是参与脑组织生化代谢和多种生理活性物质合成的重要氨基酸(张昌颖等, 1988)。另外,值得一提的是,本研究中3种石斑鱼肌肉中赖氨酸的含量(湿重)均较高,分别为1.58%、1.72%和1.84%,其AAS和CS分值均已超过FAO/WHO标准和鸡蛋蛋白标准,是前者的1.41~1.69倍。我国居民普遍以谷物为主食,而赖氨酸是一般谷类和人乳蛋白质的第一限制性氨基酸(徐善良等, 2012),由此,3种石斑鱼均可为国民弥补因以谷物为主食所引起的赖氨酸摄入不足,同时也可以开发为优质的催乳食品(徐革锋等, 2013)。3种石斑鱼不仅氨基酸含量丰富,还具有良好的营养和保健作用,是人类优质的氨基酸补充源。
3.2.2 氨基酸营养品质评价FAO/WHO根据婴儿的必需氨基酸需求量(各年龄段人群中最高)制定了最低限度的评分标准(AAS)。鸡蛋蛋白质被认为是营养最全面的,因此也被制定蛋白质的评定标准(CS)(刘俊利等, 2011)。二者被广泛认为是评定食品中氨基酸营养价值的重要指标。在本研究中,3种石斑鱼的肌肉中除缬氨酸和蛋氨酸外,其他氨基酸的AAS均接近或大于1;除蛋氨酸外,其他氨基酸的CS均大于0.6。说明这3种石斑鱼均可以为人类提供丰富的必需氨基酸,且氨基酸的平衡性较好。本研究表明,无论是以AAS还是CS为标准,3种石斑鱼的第一限制性氨基酸均为蛋氨酸,第二限制性氨基酸均为缬氨酸。因此,在对3种石斑鱼进行饲养或食品加工时,额外添加这2种必需氨基酸,能够进一步提高石斑鱼的鱼肉品质。
鱼肉的鲜美程度由肌肉中鲜味氨基酸的组成与含量决定。3种石斑鱼肌肉中鲜味氨基酸的含量分别为6.31%、6.83%和7.16%(表 2)。鲜味氨基酸中以谷氨酸的鲜味最强,3种石斑鱼肌肉中的谷氨酸含量分别为1.06%、2.61%和2.73%。由此可以看出,3种石斑鱼肌肉中鲜味氨基酸的含量均较高,其中,云龙石斑鱼肌肉中鲜味氨基酸总量最高,且谷氨酸含量最高。因此,云龙石斑鱼的鲜美程度上要优于前二者。
3种石斑鱼肌肉中的支链氨基酸(Val、Ile和Leu)分别占氨基酸总量的19.65%、18.84%和19.07%,支链氨基酸含量均较高。支链氨基酸与芳香族氨基酸的比值称为支芳值(F)。人和哺乳动物的F值在正常情况下为3.0~3.5,而当肝受损伤时,则降为1.0~1.5,因此,支链氨基酸可用于治疗肝硬化(黄薇等, 2014)。3种石斑鱼肌肉的F值分别为2.22、2.57和2.60 (表 2),均明显高于人体肝脏受损时的水平。因此,3种石斑鱼肌肉均可较好地为肝病患者补充支链氨基酸,具有良好的保健作用。
3.3 矿物质元素组成评价矿物质元素通过参与人体新陈代谢及各种生化反应,维持机体渗透压和酸碱平衡。本研究检测了K、Na、Ca、Mg、P、Zn、Cu、Fe、Mn和Se共10种矿物质元素,除微量元素Mn未被检出外,其他矿物质元素均有检出。3种石斑鱼的肌肉中均是K含量最高,K可以维持人体体液的酸碱平衡和神经肌肉的应激性,调节机体渗透压。Na和K一样,参与维持机体多种代谢平衡,通常与K配合发挥作用。3种石斑鱼肌肉中的K/Na分别为7.7、4.2和6.3,说明3种石斑鱼均属于高钾低钠食物。K可以促进Na的排除,能够通过扩张血管,降低血管阻力从而降低血压。因此,K含量丰富的3种石斑鱼均适合高血压及心血管疾病患者食用。另外,这3种石斑鱼肌肉中的Zn含量均较为丰富。Zn对婴幼儿十分重要,儿童缺Zn会导致免疫力和智力下降,引起厌食及赖氨酸缺乏等症状。本研究显示,3种石斑鱼肌肉中富含多种矿物质元素,尤其是K和Zn,可为人类尤其是儿童提供丰富的Zn。
对鱼类而言,肌肉中有恒定的钙磷比,3种石斑鱼肌肉中的钙磷比分别为0.57、1.19和1.96,高于其他多种鱼类。因此,在配制饲料的过程中,需要注意饲料中的钙磷比例。另外,3种石斑鱼肌肉的锌铜比分别为32.8、32.2和8.9,锌铁比分别为1.2、2.5和1.0。按照Hill和Matron提出的“理化性质相似的元素,其生物学功能相互拮抗”,且这种拮抗作用通常发生在锌铜比 > 10及锌铁比 > 1的情况下(Pellet et al, 1980)。由此可知,云龙石斑鱼肌肉中的Cu、Fe、Zn比例比较合理。云纹石斑鱼和鞍带石斑鱼肌肉中的Zn含量远远高于Cu和Fe,从而影响Cu和Fe的吸收,导致二者摄入不足。因此,在食用这2种石斑鱼时,需注意Cu和Fe的摄入,使三者能充分吸收利用。
4 结论3种石斑鱼均是蛋白质含量丰富且脂肪含量相对适中的优质海水鱼类,其氨基酸种类齐全且平衡性好,必需氨基酸组成符合FAO/WHO的理想模式,支链氨基酸与芳香族氨基酸的比值均接近正常人体水平,氨基酸总量、必需氨基酸和鲜味氨基酸含量均较高,说明本研究中的3种石斑鱼均是味道鲜美且营养价值高的优质蛋白源。根据AAS和CS,3种石斑鱼肌肉的第一限制性氨基酸均为蛋氨酸,第二限制性氨基酸均为缬氨酸。3种石斑鱼肌肉中含有多种矿物质元素,可为人体补充多种矿物质。
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