2. 上海海洋大学水产与生命学院 上海 201306
2. College of Fisheries and Life Science, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306
印尼拟松鲷(Datnioides pulcher),亦称印度尼西亚虎鱼,为鲈形目(Perciformes)、鲈亚目(Percoidei)、松鲷科(Lobotidae)、拟松鲷属(Datnioides)的洄游性鱼类,属拟松鲷鱼类中观赏性较高的一种。印尼拟松鲷原产于泰国、柬埔寨和印度尼西亚等东南亚国家,与金龙鱼(Scleropages formosus)混养非常具有观赏性。
中国是拟松鲷属鱼的主要进口国之一,在观赏鱼市场中其需求量缺口非常巨大,近几年,以泰国虎鱼(Datnioides microlepis)为标榜的亚洲拟松鲷属鱼类在中国的数量逐年增多,但价格居高不下,这主要是因为拟松鲷属鱼类属于洄游性鱼类,且雌雄难辨,其繁育技术和规模化生产仍然面临很多挑战,相关基础研究薄弱,因此,加强对印尼虎鱼进行研究,对其开发利用具有重要意义。目前,国内外对拟松鲷鱼类的研究鲜有报道,仅有泰北细纹虎(Datnioides undecimradiatus)(Wang et al, 2016a)和粗纹泰国虎(Datnioides microlepis)(Wang et al, 2016b)相关线粒体测序分析以及银老虎(Datnioides polota)血细胞生化特征(Acharya et al, 2018)相关报道,鲜有关于拟松鲷鱼类相关基础研究。中国水产科学研究院珠江水产研究所观赏渔业研究室于2017年经原产地引进印尼拟松鲷,构建了其稳定的繁育群体。目前,尚未见该鱼肌肉营养成分和营养价值评定相关报道。本研究通过测定和分析印尼拟松鲷肌肉的营养成分和营养品质,评估其作为食用鱼的开发利用价值,也可为印尼拟松鲷营养需求和配合饲料的研究提供参考。
1 材料与方法 1.1 实验材料供试印尼拟松鲷取自中国水产科学研究院珠江水产研究所观赏渔业养殖基地。挑15尾健康无病害的2龄养殖个体用于检测分析(图 1)。个体平均体长为(21.34±1.74) cm,平均体重为(461.00±28.56) g。清水洗净样品鱼,擦干体表水分,将15尾鱼随机分成3份,每5尾鱼1份,去皮去鳞,取背部两侧肌肉,在冰浴条件下混合搅碎,称取适量鲜样,将5尾鱼的肌肉鲜样混合组成1个样本,共3个样本,每个样本约200 g,样品制备后置于–20℃冰箱保存待测。测量时,将样品真空冷冻干燥至恒重,研磨混匀,再将样品分为2份,分别进行一般营养成分、氨基酸和脂肪酸组成的测定。
肌肉中水分含量的测定采用GB5009.3-2016的105℃烘干法;粗蛋白质含量的测定采用GB5009.5-2016的凯氏定氮法;粗脂肪的测定采用GB/T 5009.6-2016的酸水解法,试样经2 mol/L盐酸水解后用无水乙醚或石油醚提取,除去溶剂即得游离态和结合态脂肪的总含量;粗灰分的测定采用GB5009.4-2016的高温灰化法。
1.2.2 氨基酸的测定氨基酸的测定采用GB 5009.124-2016的盐酸水解法,将待测样本在水解管内经6 mol/L盐酸溶液处理,混合氨基酸标准工作液和样品测定液,分别以相同体积注入氨基酸分析仪(日立L-8900型,日本)测定,以外标法通过峰面积计算样品中水解氨基酸的浓度;色氨酸经6 mol/L LiOH处理,采用液相色谱仪测定(安捷伦1100型,美国)。
1.2.3 脂肪酸的测定肌肉脂肪酸的测定采用GB5009.168-2016第三法,测试样品经水解–乙醚溶液提取其中的脂肪后,在碱性条件下经过皂化和甲酯化处理,生成脂肪酸甲酯,经气相色谱仪(Finnigan公司Trace MS型,美国)分析,按峰面积归一化法计算脂肪酸组成和百分含量,所得结果与其他经济鱼类和淡水鱼类的营养成分测量结果进行比较。
1.3 肌肉营养价值评价采用1991年中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所提出的鸡蛋蛋白模式和1973年联合国粮农组织/世界卫生组织(FAO/WHO)建议的评分标准模式(樊佳佳等, 2018; 赵婷婷等, 2015),计算氨基酸评分(Comprehensive evaluation in amino acids score, AAS)、化学评分(Chemical score, CS)和必需氨基酸指数(Essential amino acid index, EAAI)的公式如下:
$\mathrm{CS}=\mathrm{aa} / \mathrm{AA}(\mathrm{egg}) \times 100 $ |
$\mathrm{AAS}=\mathrm{aa} / \mathrm{AA}(\mathrm{FAO} / \mathrm{WHO}) \times 100 $ |
${\rm{EEAI}} = \sqrt[n]{{\frac{a}{A} \cdot \frac{b}{B} \cdot \frac{c}{C} \cdots \frac{j}{J}}} \times 100\% $ |
式中,样品中氨基酸检测含量(%, DM)以aa表示;FAO/WHO评分标准模式中的同种氨基酸含量(%, DM)以AA(FAO/WHO)表示;全鸡蛋蛋白质中的同种氨基酸的含量(%, DM)以AA(egg)表示;必需氨基酸种类数以n表示。虎鱼肌肉中的必需氨基酸含量(%)用a、b、c……j表示,鸡蛋蛋白质的必需氨基酸含量(%)以A、B、C……J表示。
F值:支链氨基酸和芳香族氨基酸的比值,即:F值=(缬氨酸+亮氨酸+异亮氨酸)/(苯丙氨酸+酪氨酸)。
1.4 数据分析用SPSS 20.0和Excel统计软件进行测试数据分析,对数据进行方差分析和Duncan’s多重比较,用平均值±标准差(Mean±SD)表示实验结果。
2 结果与分析 2.1 生化组成从表 1可知,印尼拟松鲷肌肉的水分含量为(65.61±0.58)%,蛋白含量为(19.44±0.29)%、脂肪含量为(6.26±1.18)%、灰分含量为(1.27±0.02)%。
由表 2可见,印尼拟松鲷肌肉中共检测出16种常见氨基酸,包括7种人体必需氨基酸(Essential aminoacids, EAA)、2种半必需氨基酸、7种非必需氨基酸(Nonessential amino acid, NEAA)和5种鲜味氨基酸酸(Delicious amino acids, DAA)。含量最高的4种氨基酸依次分别为谷氨酸(3.04%)、天冬氨酸(1.79%)、赖氨酸(1.69%)和亮氨酸(1.42%);组氨酸含量最低,为0.34%。印尼拟松鲷肌肉氨基酸总含量(TAA)为18.72%(鲜样),必需氨基酸总量为6.81%,非必需氨基酸总量的为9.40%。印尼拟松鲷肌肉氨基酸总量高于草鱼(Ctenopharynodon idellus) (15.52%)、养殖斑尾复虾虎鱼(Synechogobius ommaturus) (15.59%)、红鳍笛鲷(Lutjanus erythopterus) (13.80%)和短须裂腹鱼(Schizothorax wangchiachii) (10.88%)等(表 3)。
EAA的AAS和CS是衡量食物营养价值的重要指标,将表 2中数据换算成每克氮中含氨基酸毫克数[(氨基酸含量(mg/g N)=鱼肉中氨基酸含量(%, DM)×10×6.25/肌肉中蛋白质含量(%, DM)]后(唐雪等, 2011),与FAO/WHO建议的氨基酸评分标准模式和鸡蛋蛋白质的氨基酸模式进行比较,并计算出印尼拟松鲷的AAS、CS和EAAI。从表 3可见,印尼拟松鲷EAA总量高于FAO/WHO模式,但稍低于鸡蛋蛋白质的氨基酸模式。印尼拟松鲷的AAS值均接近或大于1,CS值(除蛋氨酸外)均大于0.5,表明印尼拟
松鲷氨基酸组成均衡。赖氨酸的氨基酸和化学评分最高,分别为1.60和1.24;蛋氨酸的评分最低,缬氨酸次之,说明印尼拟松鲷第一和第二限制性氨基酸分别是蛋氨酸和缬氨酸,支链氨基酸与芳香族氨基酸的比值(F值)为2.11,比值较高,支链氨基酸有护肝、降低胆固醇和抑制癌细胞等功能。由表 4可见,印尼拟松鲷的EAAI (79.46)高于布氏罗非鱼(Tilapia buttikoferi) (73.43%)(赵婷婷等, 2015)、斑尾复虾虎鱼(70.19%)(黄薇等, 2014)、红鳍笛鲷(陈涛等, 2016)(63.96%)、草鱼(61.53%)(朱冰等, 2017)等,说明印尼拟松鲷的氨基酸含量均衡丰富,可见其肌肉功能必需氨基酸满足率较高,是一种优质蛋白源。
从表 5印尼拟松鲷肌肉脂肪酸含量和组成可见,检测所的脂肪酸种类较多,印尼拟松鲷肌肉富含不饱和脂肪酸(Unsaturated fatty acid, UFA)和人体必需脂肪酸(Essential fatty acid, EFA),共检测出27种脂肪酸,其中,饱和脂肪酸(Saturated fatty acid, SFA)含量为33.79%,共11种;不饱和脂肪酸达69.34%,共16种,包括7种单不饱和脂肪酸(Monounsaturated fatty acid, MUFA)和9种多不饱和脂肪酸(Polyunsaturated fatty acids, PUFA),含量分别为34.62%和34.72%。SFA中棕榈酸的比例最高(20.51%);月桂酸的比例最低(0.06%);MUFA中油酸比例最高(23.99%),豆蔻一烯酸比例最低(0.15%)。SFA/UFA为48.73%,说明不饱和脂肪酸含量高于饱和脂肪酸含量。
从营养角度看,食品中干物质的相对含量越高,其总营养成分的含量就越高。鱼肉中的蛋白质和脂肪含量是评价其营养价值的重要指标。印尼拟松鲷的肌肉粗蛋白含量为19.44%,含量高于草鱼(15.10%)(朱冰等, 2017)、鳙鱼(Aristichthys nobilis)(15.3%)(周朝伟等, 2018)、乌鳢(Channaargus)(11.58)(周朝伟等, 2018)和短须裂腹鱼(14.24%)(王崇等, 2017);粗脂肪含量为6.26%,明显高于秀丽高原鳅(3.73%)、尼罗罗非鱼(1.75%)(赵婷婷等, 2015)、草鱼(0.62%)(赵婷婷等, 2015)、七彩神仙鱼(0.86%)(王磊等, 2016)、斑尾复虾虎鱼(0.87%)(黄薇等, 2014)和诸氏鲻虾虎鱼(0.62%)(李建军等, 2013)等,而与黄颡鱼(5.24%) (邵韦涵等, 2018)和斑石鲷(7.80%)(尤宏争等, 2016)相近。鱼类肌肉脂肪含量达到3.5%~4.5%时,鱼肉才有较好的适口性,印尼拟松鲷肌肉脂肪含量高,使其在肉质的口感方面具有优势,也预示其肌肉比能值较大,研究表明,印尼拟松鲷是一种蛋白质和脂肪含量非常丰富的淡水经济鱼类。
印尼拟松鲷肌肉中氨基酸总含量(TAA)为18.72% (鲜样),高于养殖斑尾复虾虎鱼(15.59%)(黄薇等, 2014)、草鱼(15.52%)(朱冰等, 2017)、红鳍笛鲷(13.8%) (陈涛等, 2016; 王崇等, 2017)和短须裂腹鱼(10.88%) (王崇等, 2017)等。从氨基酸组成上看,印尼拟松鲷肌肉氨基酸中含量最高的为谷氨酸,这一组成特点与布氏罗非鱼(赵婷婷等, 2015)、黄斑蓝子鱼(Siganus oramin)(庄平等, 2008)和江鳕鱼(Lota lota)(徐革锋等, 2013)等鱼类分析结果一致。谷氨酸不仅是具有成味作用的鲜味氨基酸,也参与了多种生理活性物质合成(徐革锋等, 2013);印尼拟松鲷肌肉中共有5种鲜味氨基酸,包括谷氨酸、天冬氨酸、甘氨酸、丙氨酸和酪氨酸,是决定肌肉鲜美程度的主要因素,其中,甘氨酸和丙氨酸是呈现甘味的特征氨基酸,鲜味氨基酸在肌肉中的总含量为7.89%,鲜味氨基酸占氨基酸总量的42.15%,含量高于养殖斑尾复虾虎鱼(38.14%) (黄薇等, 2014)、红鳍笛鲷(37.6%) (陈涛等, 2016)、黄条
脂肪酸是维持细胞的正常生理功能所不可或缺的营养物质,在人体中具有酯化胆固醇、降低血液黏稠度及提高脑细胞活性等生理功能。印尼拟松鲷的UFA总含量为69.34%,高于尼罗罗非鱼、布氏罗非鱼(赵婷婷等, 2015)、草鱼、短须裂腹鱼(王崇等, 2017)和诸氏鲻虾虎鱼(李建军等, 2013)等经济鱼类,其中,油酸和亚油酸含量较高,分别为23.99%和10.56%,远高于短须裂腹鱼和布氏罗非鱼等经济鱼类(赵婷婷等, 2015; 王崇等, 2017)。油酸能够显著降低血液中的总胆固醇和有害胆固醇,降低低密度脂蛋白(LDL-C)水平以及冠状心脏病的发生几率(徐善良等, 2012)。亚油酸可在体内衍生为花生四烯酸(C20:4),显著降低血液中的胆固醇含量,有效改善血液循环,抑制动脉粥样硬化,预防心血管疾病的发生(赵婷婷等, 2015)。PUFA具有明显的降血脂、降血压和抗肿瘤等功效,在促进神经系统视觉系统的发育,防治心血管疾病、抗癌和抗炎等方面具有积极作用(赵亭亭等, 2018; 贡艺等, 2018)。此外,高含量PUFA可显著增加鲜香味,并在一定程度上显示肌肉的多汁性(徐革锋等, 2013),印尼拟松鲷的PUFA总量为34.72%,高于短须裂腹鱼(20.12%)(柳学周等, 2017; 王崇等, 2017)、黄条
饲料蛋白质的氨基酸组成有着和机体自身氨基酸组成特征相似的特征,因此,可依据鱼类肌肉营养成分的特征分析,推算其对饲料营养成分的需要量(邴旭文等, 2006),如通过报道鲤肌肉蛋白质中所需氨基酸含量来推算其必需氨基酸需求量等(Ogino, 1980)。目前,印尼拟松鲷养殖主要以健康的鲮(Cirrhinus molitorella)和麦瑞加拉野鲮(Cirrhinus mrigala)为主要饵料,以新鲜小河虾(Macrobranchium nipponense)和食蚊鱼(Gambusia affinis)作为健康苗种为补充饵料,尚没有符合该鱼营养特征的专用配合饲料。根据本研究对印尼拟松鲷营养特征的研究,可推测该鱼对必需氨基酸的需求水平,为鱼类配合饲料中氨基酸的平衡模式提供数据基础。
研究表明,印尼拟松鲷肌肉中的蛋白质含量较高,必需氨基酸和鲜味氨基酸含量丰富,氨基酸种类齐全,是一种高质量的鱼类蛋白源。根据AAS和CA分值,可见印尼拟松鲷的第一和第二限制性氨基酸为蛋氨酸和缬氨酸。此外,印尼拟松鲷肌肉脂肪含量较高,口感鲜度和营养价值俱佳,是兼具较高观赏价值和食用价值的可开发鱼类品种,今后可开展印尼拟松鲷的全人工繁育及养殖技术研发。
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