2. 黑龙江省水产技术推广总站 黑龙江 哈尔滨 150010
2. Heilongjiang Province Fisheries Technology Extension Center, Harbin, Heilongjiang 150010, China
绒螯蟹(Eriocheir sensu stricto)是我国重要的水产经济养殖品种之一(姜晓东等, 2016),目前消费者所知最多的是河蟹,且绝大多数消费者认为河蟹即中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis),这不严谨。中华绒螯蟹简称为河蟹,但河蟹不仅包括中华绒螯蟹一个种,还包括日本绒螯蟹(Eriocheir japonicus)和合浦绒螯蟹(Eriocheir hepuensis)两个种(Guo et al, 1997; Wang et al, 2008; Xu et al, 2009; 王武等, 2013),所以严格来说河蟹是绒螯蟹的简称,更为准确。绒螯蟹是降河洄游生活史的水产动物,在河口半咸水区域交配并产卵,孵化后的大眼幼体再迁移到淡水中生长(Cheng et al, 2008)。绒螯蟹广泛分布于我国沿海的各大水系中,北至黑龙江省绥芬河水系,南至广西壮族自治区南流江水系,均有野生绒螯蟹的群体分布。2020年全国绒螯蟹产量为77.59万t (农业农村部渔业渔政管理局, 2021),养殖产量较高的区域主要集中于长江流域,如江苏、湖北、安徽和辽河流域如辽宁等省。虽然我国绒螯蟹产业规模较大,但目前开发利用的绒螯蟹种质主要是长江和辽河水系中华绒螯蟹(王武等, 2013),而其他水系的绒螯蟹种质资源状况了解甚少。
绥芬河绒螯蟹是分布于黑龙江省牡丹江市东宁市绥芬河水系的土著野生绒螯蟹群体。张志华等(2005)指出,绥芬河绒螯蟹学名应为日本绒螯蟹,因绒螯蟹是洄游性水产动物,绥芬河绒螯蟹被认为是日本海的日本绒螯蟹溯河洄游到绥芬河而形成的地理群体。2003年黑龙江省水产技术推广总站开展科技攻关,设立“绥芬河河蟹人工繁育及养殖技术研究”科研项目,初次实现绥芬河绒螯蟹苗种的人工繁育,并成功孵化出80 kg的大眼幼体(张志华等, 2005)。近些年,随着辽宁盘锦中华绒螯蟹种质退化严重,“牛奶病”病害频发,而绥芬河绒螯蟹因规格相对较大,部分孵化企业从业者到黑龙江收集绥芬河绒螯蟹进行苗种繁育。在苗种繁育之前,首先要系统调查绥芬河水系野生绒螯蟹的种质资源状况,并阐述其优异性状,这样才能为新种质开发利用提供重要支撑,而绥芬河水系野生绒螯蟹种质资源评估内容却一直未见报道,这对全面评估绒螯蟹新种质十分不利。2021年《农业农村部关于开展全国农业种质资源普查》的文件中提出:“农业种质资源是保障国家粮食安全和重要农产品有效供给的战略性资源,是农业科技原始创新与现代种业发展的物质基础”,对打赢我国水产种业翻身仗具有重要的意义。杨雨虹等(2022)研究表明,中华绒螯蟹是高盐碱耐受性水产动物,适宜在低中碱度盐碱水中开展养殖。而新绒螯蟹种质开发利用对我国绒螯蟹产业发展及盐碱水养殖均具有重要意义,为此,团队利用2年时间分别收集了绥芬河水系野生绒螯蟹,并对其性成熟比例、平均体重、体重分布、色泽和常规营养成分进行测定和分析,以期为绒螯蟹新种质资源评估及开发利用提供基础数据。
1 材料与方法 1.1 样品来源本研究所用绒螯蟹为2020和2021年9月采用地笼捕捉自绥芬河水系的野生绒螯蟹,捕捉江段为绥芬河水系东宁段(44.01°N, 131.14°E)。两年共捕捉雌体156只,雄体143只。活体运输至中国水产科学研究院黑龙江水产研究所黑龙江省冷水性鱼类种质资源及增养殖重点开放实验室进行分析测定。
1.2 性成熟个体及体重分布统计根据王武等(2013)判别所捕获绥芬河水系野生绒螯蟹性成熟状况,并计算未性成熟与性成熟个体百分比含量。生殖蜕壳的判断标准:雌体主要依据腹脐形状和腹脐绒毛长度;雄体主要依据交接器是否突出和硬化、大螯绒毛覆盖面积和长度(王世会等, 2019a)。用电子天平(型号:JA2002, 精确度为0.01 g, 上海浦春计量仪器有限公司)逐一称量所有捕获绒螯蟹个体,计算未性成熟与性成熟的平均体重,并统计各规格所占总个体数的百分比含量。
1.3 性成熟绒螯蟹可食组织比例及肥满度测定选取性成熟且百分比含量最高的绒螯蟹组雌雄体各15只,用电子天平准确称量,并用游标卡尺(型号:605,精确度为0.01 mm,哈尔滨量具刃具有限责任公司)测量甲壳长和甲壳宽,计算肥满度(condition factor, CF)。解剖取出全部肝胰腺和性腺精确称重,计算肝胰腺指数(hepatosomatic index, HSI, %)和性腺指数(gonadosomatic index, GSI, %)。精刮绒螯蟹一半肌肉,计算出肉率(muscle yield, MY, %)和总可食率(total edible yield, TEY, %)(王世会等, 2019a)。
CF = W/L3;
HSI (%) = 100×WH/W;
GSI (%) = 100×WG/W;
MY (%) = 100×WM/W;
TEY (%) = GSI+HSI+MY
式中,L为甲壳长(cm),WH为肝胰腺重(g),WG为性腺重(g),WM为肌肉重(g),W为体重(g)。
1.4 色泽及常规营养品质测定选取解剖后获得的甲壳、肝胰腺和性腺样品,用高精度分光测色仪(型号:CR-400,日本柯尼卡美能达控股公司)分别测定湿样和冻干样的色泽,每个样品随机测量3个点取平均值作为其色泽的参考值,测量参数包括亮度值(L*)、红度值(a*)和黄度值(b*) (Long et al, 2017)。
采用真空冷冻干燥法(赵恒亮, 2016)测定绒螯蟹可食组织(肝胰腺、性腺和肌肉)的水分含量(–50℃真空冷冻至恒重);采用AOAC(1995)方法测定绒螯蟹可食组织中的粗蛋白(凯氏定氮法)和灰分(550℃灼烧至恒重);参考GB 5009.6-2016《食品中脂肪的测定》索氏抽提法提取绒螯蟹可食组织中粗脂肪并测定其含量。
1.5 数据分析应用SPSS 22.0软件处理实验数据并统计分析,所有数据均采用平均值±标准误(Mean±SE)表示。采用Levene法进行方差齐性检验,当不满足齐性方差时,对百分比数据进行反正弦或平方根处理。采用独立T检验检查各项指标间的差异性,P < 0.05为差异显著。
2 结果与分析 2.1 性成熟比例及平均体重分布9月末黑龙江省绥芬河水系(东宁段)野生绒螯蟹存在未性成熟和性成熟两种状态,比例如图 1所示。雌体未性成熟比例为(24.36±2.56)%,性成熟比例为(75.64±3.97)%,性成熟比例显著高于未性成熟比例(P < 0.05);雄体未性成熟比例为(65.03±3.08)%,性成熟比例为(34.97±2.46)%,性成熟比例显著低于未性成熟比例(P < 0.05)。未性成熟和性成熟绒螯蟹平均体重如图 2所示。雌体未性成熟绒螯蟹平均体重为(70.28± 4.03) g,性成熟绒螯蟹平均体重为(110.51±2.42) g,性成熟绒螯蟹平均体重显著高于未性成熟绒螯蟹(P < 0.05);雄体未性成熟绒螯蟹平均体重为(75.25± 2.95) g,性成熟绒螯蟹平均体重为(147.79±5.94) g,性成熟绒螯蟹平均体重显著高于未性成熟绒螯蟹(P < 0.05)。
绥芬河绒螯蟹不同规格分布比例如图 3所示。就雌体而言(图 3),未性成熟绒螯蟹平均体重主要集中于50.00~99.99 g范围内,且不同规格组间存在显著性差异(P < 0.05)。性成熟绒螯蟹平均体重主要集中于75.00~149.99 g范围内,除50.00~74.99 g规格和175.00~199.99 g规格间无显著性差异外,其余各规格组间均存在显著性差异(P < 0.05),同时≥100.00 g的个体数比例达到了55.94%。就雄体而言(图 3),未性成熟绒螯蟹平均体重主要集中于30.00~124.99 g范围内,除125.00~149.99 g规格和150.00~174.99 g规格无显著性差异外,其余各规格组间均存在显著性差异(P < 0.05)。性成熟绒螯蟹平均体重分布较为分散,除175.00~199.99 g、200.00~224.99 g和≥225.00 g规格无显著性差异外,其余各规格组间均存在显著性差异(P < 0.05),同时≥125.00 g的个体数比例达到了60.00%。
绥芬河绒螯蟹雌体和雄体可食组织比例及CF比较见表 1所示。雌体平均体重、MY和CF显著低于雄体(P < 0.05),而HSI和GSI则显著高于雄体(P < 0.05),其余指标甲壳长、甲壳宽和TEY则无显著性差异(P > 0.05)。
绥芬河绒螯蟹成体色泽参数见表 2所示。雌体甲壳湿样及干样的L*和b*均显著低于雄体(P < 0.05) (图 4),肝胰腺湿样的L*显著低于雄体(P < 0.05),其余甲壳和肝胰腺雌雄性别间色泽参数均无显著性差异(P > 0.05)。
绥芬河绒螯蟹常规营养品质如表 3所示。就性腺而言,雌体水分含量显著低于雄体(P < 0.05),而粗蛋白和粗脂肪含量则显著高于雄体(P < 0.05),灰分含量无显著性差异(P > 0.05);就肝胰腺而言,雌雄性别间均无显著性差异(P > 0.05);就肌肉而言,雌体粗蛋白含量显著高于雄体(P < 0.05),其余指标无显著性差异(P > 0.05)。
种质资源(又称为遗传资源)是亲代传递给子代的遗传物质,往往存在于物种之中(Primack, 1992),包括野生物种、培育推广的新品种以及重要的遗传材料等(刘英杰等, 2015)。野生土著种的开发利用是增加水产养殖新品种的重要途径,而种质资源调查则是了解野生种质资源状况的重要手段。本研究表明,9月末绥芬河水系野生绒螯蟹性成熟雌体平均体重为(110.51±2.42) g,雄体为(147.79±5.94) g,这显著高于闽江水系(徐建峰等, 2020)和南流江水系野生绒螯蟹体重(2019年度调研)。通常来讲,长江流域中华绒螯蟹个体平均体重最大,随着纬度升高或降低,绒螯蟹个体平均体重均逐渐减小。例如,由于二龄辽河水系中华绒螯蟹长成规格较小,故养殖区域主要限制在东北及华北部分地区。目前,南流江水系绒螯蟹由于并未开发利用,但通过调研可知其平均体重较小。但在黑龙江省,绥芬河野生绒螯蟹的平均体重却显著高于人工养殖中华绒螯蟹,与通常认知有悖。与人工池塘养殖或稻田养殖环境相比较而言,绥芬河野生绒螯蟹生长于绥芬河天然水域中,推测可能水体平均深度较大,水温较低,同时动物性饵料资源较为匮乏等因素,导致2年生长期不能性成熟,故生活史延长到3年或4年,多1~2年的生长期直接影响了绥芬河野生绒螯蟹雌雄个体平均体重。这与刘艳春(2014)提及的黄河三角洲天然水域中也存在大规格个体的成因相似。绥芬河野生绒螯蟹未性成熟雌体平均体重为(70.28±4.03) g,雄体则为(75.25±2.95) g,而在水温、水草和饵料资源均很丰富的前提下,一年人工养殖扣蟹的平均体重仅约为4.00~10.00 g左右(王世会等, 2019b),通过这个数据也能从侧面反映绥芬河天然水域中绒螯蟹的生活史不太可能是2年。目前关于蟹类年龄鉴定文献报道较少,仅从蟹类眼柄组织切片观察生长纹细纹与宽纹等(蒋瑞等, 2018; 倪震宇等, 2019)角度探讨过,这为蟹类年龄鉴定提供了新的方法,但对在生产实践中蟹类年龄鉴定指导意义有限,并未广泛应用。
就性别差异而言,雌体平均体重要小于雄体,这在许多水产动物体现出较为明显的生长速度差异(王世会等, 2019b),同时雄体规格大于雌体,也有利于繁殖群体中雌体保持生殖潜力(杜楠等, 2021)。本研究表明,雌体HSI、GSI和TEY高于雄体,而MY和CF则低于雄体,这与以往公开报道文献结果一致(王世会等, 2020; Wang et al, 2021),说明野生绒螯蟹与人工养殖中华绒螯蟹在可食组织比例和CF等指标参数上是一致的。但由于野生绒螯蟹的生物饵料不足等原因,其GSI数值略低于人工养殖绒螯蟹,性腺发育速度较慢。
色泽是绒螯蟹感官评价的重要指标参数,也是影响消费者购买欲的重要因素(Tume et al, 2009; Long et al, 2017)。通常来讲,绒螯蟹的甲壳及可食组织红度值越高,则相对市场价格越高(Chien et al, 1992),L*、a*和b*是评价水产动物色泽的重要指标参数,数值高低与其中的类胡萝卜素(尤其是虾青素)含量密切相关(Long et al, 2017)。本研究中,雄体甲壳的L*和b*值均显著高于雌体,这与西双版纳池塘养殖中华绒螯蟹的甲壳色泽数据相似(王世会等, 2019c)。雄体肝胰腺a*值高于雌体,可能原因是由于在性腺发育过程中,雌蟹肝胰腺中的大量类胡萝卜素营养被转运至卵巢性腺发育,而雄体肝胰腺中营养则无需转移至精巢(王世会等, 2019c)。
可食组织中常规营养成分是评价水产品营养价值的重要指标(Kause et al, 2002)。绒螯蟹营养成分组成受遗传、养殖环境和饵料等多种因素影响(成永旭等, 1998; Wu et al, 2011)。本研究表明,绥芬河野生绒螯蟹肝胰腺和肌肉的常规营养成分因性别差异影响不大,而性腺中常规营养成分则因性别差异影响较大,这与王世会等(2019a、2020)报道结果一致。就不同可食组织比较而言,性腺和肌肉中粗蛋白含量较高,而肝胰腺中粗脂肪含量较高,这可能与性腺中蛋白积累为性腺发育提供营养及能量有关,而肝胰腺则是甲壳动物脂质存储和代谢的重要器官(Vogt, 1994)。尤其值得关注的数据是,绥芬河野生绒螯蟹卵巢中粗蛋白/粗脂肪的含量比值为2.68,而山东东营、青海海西蒙古族藏族自治州、上海崇明岛和云南西双版纳(王世会等, 2019a; Wang et al, 2021)养殖中华绒螯蟹卵巢中粗蛋白/粗脂肪的比值仅为1.80、2.11、1.84和1.94。绥芬河野生绒螯蟹雌体和雄体肌肉中粗蛋白/粗脂肪的比值高达25.85和26.51,而山东东营、青海海西蒙古族藏族自治州、上海崇明岛和云南西双版纳(王世会等, 2019a; Wang et al, 2021)养殖绒螯蟹雌体比值仅为14.28、16.32、18.31和15.48,雄体比值仅为15.98、17.32、16.44和19.33。以上数据说明,与其他地区养殖或野生绒螯蟹比较而言,绥芬河野生绒螯蟹可食组织(卵巢和肌肉)是一种高蛋白低脂肪的食物,符合人们对高蛋白低脂肪食物的需求。
综上所述,绥芬河野生绒螯蟹性成熟个体平均体重较大,且大规格个体百分比含量较高,可食组织比例、CF指标、色泽及常规营养品质与现已开发利用的辽河和长江水系中华绒螯蟹无明显差异,但卵巢和肌肉中粗蛋白与粗脂肪比例更加符合人体对高蛋白低脂肪食物的需求,是一种具有较大开发潜力的绒螯蟹新种质。
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